蛇葡萄素鈉體外損傷腫瘤細(xì)胞線粒體的作用研究.pdf

1、為進(jìn)一步明確蛇葡萄素鈉(Amp-Na)抗腫瘤作用的靶點(diǎn)及機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)結(jié)合Amp-Na對(duì)人肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞和小鼠惡性黑色素瘤B16細(xì)胞增殖的影響，探討Amp-Na對(duì)SPC-A-1細(xì)胞形態(tài)和線粒體功能的損傷作用。 實(shí)驗(yàn)設(shè)不同濃度的Amp-Na單用組及/或與CBP的聯(lián)用組：采用MTT比色法測(cè)定藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用；用透射電鏡觀察細(xì)胞線粒體超微結(jié)構(gòu)的變化：用激光共聚焦顯微鏡測(cè)定細(xì)胞線粒體膜電位水平及細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變

2、化；用硝酸還原酶法測(cè)定線粒體NO含量，用無機(jī)磷法測(cè)定線粒體總AIP酶活性。 結(jié)果顯示： 1.Amp-Na6.25～200μg/ml對(duì)SPC-A-1細(xì)胞增殖的抑制作用具有明顯的量效關(guān)系；對(duì)B16細(xì)胞僅在高濃度(200μg/ml)可抑制增殖，且各濃度藥物與卡鉑(CBP)合用無協(xié)同作用。 2.透射電鏡觀察結(jié)果顯示：Amp-Na可以引起SPC-A-1細(xì)胞表面絨毛減少，空泡形成，線粒體腫脹，核膜皺縮，染色質(zhì)邊集。

3、3.激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果顯示：Amp-Na給藥后30 min即可降低SPC-A-1細(xì)胞線粒體膜電位(△ψm)水平，48 h后△ψm水平的下降表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系；Amp-Na給藥后30 min和48 h均可升高細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度，但無明顯量效關(guān)系。 4.Amp-Na可顯著并呈劑量依賴性地升高SPC-A-1細(xì)胞線粒體NO含量，同時(shí)可降低SPC-A-1細(xì)胞線粒體ATP酶活性。 以上結(jié)果提示，Amp-Na可能通過降低線粒體膜