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文檔簡介
1、本研究選用MT-4細(xì)胞(CD4+T淋巴細(xì)胞系)和PBMC(人外周血單核細(xì)胞)建立體外HIV-1的病毒吸附、共培養(yǎng)、急性感染三種標(biāo)準(zhǔn)感染模型,檢測蛇葡萄素對細(xì)胞的保護(hù)作用和對HIV-1抗原P24的抑制。建立H2O2體外誘導(dǎo)MT-4細(xì)胞凋亡模型,用形態(tài)學(xué)、生化及流式細(xì)胞技術(shù)檢測藥物對過氧化誘導(dǎo)凋亡的調(diào)控,評價(jià)蛇葡萄素的抗氧化損傷作用及對T淋巴細(xì)胞凋亡的抑制作用。 本實(shí)驗(yàn)擬通過體外抗病毒實(shí)驗(yàn),觀察蛇葡萄素對HIV-1感染的抑制作用;了解蛇
2、葡萄素、RANTES、SDF-1α各自的趨化作用和相互影響;利用熒光標(biāo)記單克隆抗體,檢測蛇葡萄素對HIV-1輔助受體CXCR4的作用;選用研究HIV-1作用常用的CD4+T淋巴細(xì)胞系MT-4細(xì)胞,采用過氧化氫(H2O2)為誘發(fā)因素,通過MTT法檢測細(xì)胞的存活率,Hoechst33258核染色法、瓊脂糖凝膠電泳法和流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡情況;對蛇葡萄素清除氧自由基的能力進(jìn)行檢測,同時(shí)采用體外誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞氧化應(yīng)激凋亡模型,用形態(tài)學(xué)、生化
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