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文檔簡介
1、HIV發(fā)病率(incidence rate)對于監(jiān)測艾滋病的流行狀況、了解艾滋病的傳播模式、制定相應(yīng)的干預(yù)和預(yù)防措施,并進而評價防治策略和干預(yù)措施的有效性具有重要意義。開發(fā)新的生物分子標(biāo)記用于橫斷面調(diào)查以估算研究人群的發(fā)病率是當(dāng)前HIV發(fā)病率研究的主要方向。但是,由于HIV感染的臨床潛伏期可長達8-10年,區(qū)分新發(fā)感染和既往感染仍然是當(dāng)前艾滋病防治中主要的科學(xué)挑戰(zhàn)之一。
當(dāng)前,血清學(xué)方法中利用BED檢測方法確定新發(fā)感染得到
2、了廣泛應(yīng)用。最近的研究試圖利用核酸檢測方法測定HIV-1感染者體內(nèi)準(zhǔn)種的遺傳多樣性,以此來區(qū)分新發(fā)感染和既往感染。本研究利用北京男男同性戀隊列(35例)和新疆靜脈吸毒感染者隊列(27例)的血漿樣本,分別采用BED方法、基于模式的基因距離方法和近期發(fā)表的HD(Hamming Distance)方法進行研究,獲得了不同檢測/分析方法區(qū)分HIV新發(fā)感染和既往感染的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度,并分析了不同方法確定新發(fā)感染的影響因素。
3、本研究利用SGA方法擴增env基因V1-V5(1000bp)片段,對獲得的PCR產(chǎn)物直接進行序列測定,共獲得env基因序列1017條,樣本的序列數(shù)的中位數(shù)為16條(8-28條)。利用系統(tǒng)進化樹方法進行亞型分析,結(jié)果表明,北京同性戀隊列的14例感染者為CRF01_AE亞型,12例感染者為CRF07_BC亞型,9例感染者屬于B亞型。新疆隊列的所有樣本均屬于CRF07_BC亞型。
BED方法區(qū)分新發(fā)感染和既往感染(窗口期為168
4、天)的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度分別為47.06%、78.05%和68.97%;基于模式的基因距離方法區(qū)分新發(fā)感染和既往感染(窗口期為365天)時的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度分別為80.43%、66.67%、和77.59%;HD方法區(qū)分新發(fā)感染和既往感染(窗口期為365天)時的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度分別為82.61%、66.67%和79.31%。
本研究進一步利用ROC曲線分析了亞型種類、序列長度和感染時間確定準(zhǔn)確程度對三種方法區(qū)
5、分新發(fā)感染和既往感染臨界值(Cutoff)的影響。結(jié)果表明,BED方法受到感染時間確定準(zhǔn)確程度的影響;基于模式的基因距離方法在臨界值的確定上不受長度的影響,但是會受到亞型的影響;不同亞型對HD方法區(qū)分新發(fā)感染和既往感染時的臨界值沒有影響。不同序列長度對基于模式的基因距離方法臨界值沒有影響,均為0.30;相反,HD方法受分析序列的長度影響較大,當(dāng)分析序列的長度為1000bp時,臨界值為7;當(dāng)分析序列長度為540bp和500bp時,臨界值為
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