HIV-1高暴露未感染人群淋巴細胞活化狀態(tài)與HLA分型的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　 1.以中國漢族HIV-1 暴露而血清陰性者（HIV-1-exposed seronegative subjects,ESNs人群）為研究對象，以健康對照人群和人類免疫缺陷病毒Ⅰ型（HumanImmunodeficiency Virus Type 1，HIV-1）攜帶者為對照，探討三組人群DC-SIGN和DC-SIGNR基因多態(tài)性與HIV-1 不易感性的關(guān)系。
　　 2.分析三組人群HIV-1 感染相關(guān)受體的

2、表達差異，從蛋白質(zhì)表達水平上尋找與HIV-1不易感性相關(guān)的受體。
　　 3.從基因多態(tài)性的角度解釋與HIV-1 不易感性密切相關(guān)的受體差異表達原因。
　　 方法：
　　 應(yīng)用擴增片段長度多態(tài)性（PCR-ALFP）的方法進行DC-SIGN和DC-SIGNR基因多態(tài)性分析；應(yīng)用流式細胞術(shù)分析HIV-1 感染相關(guān)受體的表達差異；應(yīng)用序列特異引物PCR(sequence-specific primers，PCR-SSP)

3、分析HLA基因多態(tài)性；應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析三組人群之間受體表達和基因型分布的差異。
　　 結(jié)果：
　　 1.DC-SIGN在三組人群中以7/7 型為主,三組人群共檢出9個非7/7基因型，但DC-SIGN 各基因型分布差異無統(tǒng)計學意義（P=0.648）；DC-SIGNR 具有高度多態(tài)性，7/5、5/5和6/7基因型的頻率從ESN人群、健康對照人群和HIV-1 攜帶者逐漸降低，同時5和6等位基因的頻率也呈現(xiàn)均勻下

4、降，但各基因型分布差異無統(tǒng)計學意義（P=0.782）；
　　 2.ESNs人群T 淋巴細胞HLA-DR+CD4和HLA-DR+CD8 均顯著性低于健康對照人群（P=0.024，0.009），這兩項指標同時呈現(xiàn)顯著性正相關(guān)（P<0.001，r=0.960）；利用HLA-DR+CD8的雙峰分布特征可以將健康對照人群分為高低表達兩群；
　　 3.確切概率法卡方檢驗結(jié)果顯示，三個基因座的多態(tài)性位點中只有A*03和B*55在三組人

5、群中的分布差異有顯著性。健康對照人群HLA基因型的分析發(fā)現(xiàn)，A*02和A*24基因型在HLA-DR+CD8表達高低兩組的分布有顯著性差異（P=0.020，0.038）；
　　 等位基因分析也驗證了這個多態(tài)性變異分布的差異（P=0.007，0.009），DRB1*09等位基因分布也有顯著性差異（P=0.028）；A*02 多態(tài)性變異與HLA-DR在CD8 陽性細胞表面的表達有顯著性負相關(guān)（P=0.008）；A*24 多態(tài)性變異與H

6、LA-DR在CD8陽性細胞表面的表達有顯著性正相關(guān)（P=0.045）。
　　 結(jié)論：
　　 1.我國漢族人群DC-SIGN基因多態(tài)性變異很低，沒有繼續(xù)研究的意義；DC-SIGNR基因多態(tài)性對于HIV-1 不易感性的意義需要大樣本的驗證或細胞生物學實驗數(shù)據(jù)的支持；
　　 2.對于中國漢族人群，T 淋巴細胞低活化狀態(tài)與中國漢族人群HIV-1 不易感性密切相關(guān)，從統(tǒng)計學分析和生物學意義上可以將中國漢族人群按照HLA-D

7、R+CD8 活化高低分為HIV-1 易感人群和不易感人群；
　　 3.HLA A*02 多態(tài)性變異可能是中國漢族人群HIV-1 感染的保護性因素，而HLA A*24多態(tài)性變異可能是感染的危險因素。
　　 創(chuàng)新性：
　　 1.首次在國內(nèi)ESNs人群的研究中設(shè)定了定量的的入選標準；
　　 2.在國內(nèi)首次報道HLA-DR的高低表達與中國漢族人群HIV-1 不易感性密切相關(guān)；
　　 3.首次報道HLA-A