咖啡酸在大鼠體內(nèi)Ⅱ相代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、咖啡酸(Caffdc acid,CA),化學名為:3-(3,4-二羥苯基)-2-丙烯酸,屬于酚酸類化合物,廣泛分布于小薊、金銀花、杜仲、牛至、茵陳、蒲公英等多種藥用植物中。現(xiàn)代藥理學研究表明咖啡酸具有廣泛的生物活性,如降血壓、降血糖、抗病毒、抗氧化等。咖啡酸的生物活性依賴于其在體內(nèi)的吸收和代謝,然而國內(nèi)外關于咖啡酸的代謝研究報道較少,僅有一些關于咖啡酸在大鼠體內(nèi)藥代動力學及用離體灌流模型評價其體內(nèi)代謝方面的研究報道。為了進一步揭示咖啡酸

2、在大鼠體內(nèi)的代謝轉化情況及代謝規(guī)律,并為其體內(nèi)藥效物質基礎和新藥開發(fā)提供依據(jù),本文對咖啡酸在大鼠內(nèi)的代謝產(chǎn)物進行了深入的研究。
　　 我們首先采用液相色譜串聯(lián)質譜(LC/MS/MS)法測定大鼠灌胃給予咖啡酸(100 mg.kg-1)后血漿和尿樣中咖啡酸的Ⅱ相代謝產(chǎn)物,通過分子離子峰及碎片峰對其結構進行推測,推斷出大鼠血漿中的咖啡酸Ⅱ相代謝物有四個,分別為:兩個咖啡酸葡萄糖醛酸結合物和兩個咖啡酸硫酸結合物；推斷出大鼠尿樣中咖啡酸Ⅱ

3、相代謝產(chǎn)物有八個,分別為:兩個咖啡酸甲基化物(阿魏酸和異阿魏酸)、兩個咖啡酸葡萄糖醛酸結合物、兩個咖啡酸硫酸結合物、阿魏酸葡萄糖醛酸結合物及其硫酸結合物、異阿魏酸葡萄糖醛酸結合物及其硫酸結合物。然后對灌胃給予咖啡酸溶液的大鼠尿樣進行富集,以LC/MS/MS檢測咖啡酸Ⅱ相代謝產(chǎn)物,采用大孔吸附樹脂、ODS開放柱層析、凝膠柱層析色譜,制備高效液相色譜等方法對其進行分離純化,結果從大鼠尿樣中分離得到六個咖啡酸代謝產(chǎn)物,經(jīng) LR、MS、1H-N

4、MR.、13C-NMR、HMBC、HSQC等波譜手段鑒定了其中五個Ⅱ相代謝產(chǎn)物的結構,分別為咖啡酸-3-O-βD-葡萄糖醛酸苷(Caffeicacid-3-o-β-D-glucuromde)、咖啡酸-4-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(Caffeicacid-4-O-D-glucuronide)、咖啡酸-3-O-硫酸酯(Caffeic acid-3-O-sulfate)、咖啡酸-4-O-硫酸酯(Caffeic acid-4-O-sulfate

5、),阿魏酸(ferulic acid)。以上五個咖啡酸的Ⅱ相代謝產(chǎn)物首次從大鼠尿液中分離獲得并對其結構進行了鑒定。
　　 本文首次對咖啡酸的Ⅱ相代謝產(chǎn)物進行了系統(tǒng)研究,結果證實咖啡酸在大鼠體內(nèi)代謝廣泛,通過對咖啡酸的Ⅱ相代謝產(chǎn)物進行結構鑒定,發(fā)現(xiàn)咖啡酸葡萄糖醛酸結合物是咖啡酸在大鼠體內(nèi)主要的Ⅱ相代謝產(chǎn)物。本研究分離得到的Ⅱ相代謝產(chǎn)物為咖啡酸在大鼠體內(nèi)的定性定量研究提供了對照品,同時為闡明咖啡酸在大鼠體內(nèi)代謝規(guī)律及新藥開發(fā)提供了理