水產(chǎn)品中酒石酸銻鉀代謝產(chǎn)物檢測(cè)技術(shù)及其在鯽魚體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究.pdf

1、酒石酸銻鉀（PAT）在我國水產(chǎn)養(yǎng)殖中曾用于寄生蟲疾病的防治。由于其代謝產(chǎn)物-銻具有很強(qiáng)的毒性，農(nóng)業(yè)部193號(hào)公告以及235號(hào)公告已將其歸為禁用漁藥之列。但由于缺乏檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，不能排除部分漁民會(huì)繼續(xù)使用，并且銻毒性大、難代謝，對(duì)水產(chǎn)品質(zhì)量安全有極大威脅。PAT進(jìn)入生物體后立即分解為銻、酒石酸、以及鉀離子。由于鉀離子在生物體中屬于常量元素，不能作為檢測(cè)酒石酸銻鉀殘留指標(biāo)，而酒石酸和銻在水產(chǎn)品本底中含量低，是酒石酸銻鉀的特征代謝產(chǎn)物，因此，本文

2、以檢測(cè)二者殘留判定是否使用過PAT。同時(shí)，由于PAT中的三價(jià)銻進(jìn)入水產(chǎn)品后形態(tài)會(huì)發(fā)生變化，且毒性發(fā)生變化，因此有必要建立水產(chǎn)品中不同銻形態(tài)分析檢測(cè)方法。本文通過研究建立了水產(chǎn)品中總銻、無機(jī)銻、無機(jī)銻中的三價(jià)銻、無機(jī)銻中的Sb(Ⅴ)以及酒石酸的檢測(cè)方法；同時(shí)，對(duì)鯽魚進(jìn)行PAT藥浴試驗(yàn)，分析了鯽魚各組織中總銻、不同形態(tài)銻、酒石酸的含量變化，揭示了鯽魚體內(nèi)PAT富集代謝規(guī)律以及銻形態(tài)和價(jià)態(tài)轉(zhuǎn)化規(guī)律，并對(duì)水產(chǎn)品中PAT殘留檢測(cè)提出了參考意見。論

3、文研究?jī)?nèi)容主要有以下幾方面：
　　1.建立了水產(chǎn)品中PAT代謝產(chǎn)物-銻的順序注射-氫化物發(fā)生原子熒光（HG-AFS）檢測(cè)方法。首先利用微波消解，濕法消解，微波消解結(jié)合濕法消解的前處理方法展開對(duì)水產(chǎn)品中總銻測(cè)定研究，同時(shí)對(duì)石墨爐-HRCS AAS、氫火焰-HRCS AAS以及順序注射-HG-AFS三種檢測(cè)技術(shù)測(cè)定總銻進(jìn)行了比較，選擇了微波消解結(jié)合濕法消解順序注射-HG-AFS法檢測(cè)水產(chǎn)品中PAT代謝產(chǎn)物-總銻。在該方法下，銻檢測(cè)限為

4、0.027ng/mL。空白基質(zhì)加標(biāo)水平0.125mg/Kg、0.500mg/Kg下的平均回收率為95.97~102.09％，RSD＜6%。
　　2.建立了順序注射-HG-AFS檢測(cè)水產(chǎn)品中無機(jī)銻及其價(jià)態(tài)的方法。樣品經(jīng)4mol/L鹽酸溶液超聲浸提后加入一定量掩蔽劑、還原劑以及消泡劑在既定HG-AFS條件下測(cè)定無機(jī)銻含量。另一份相同樣品中加入混合溶液（0.5mol/L硫酸混合0.5mol/L鹽酸混合0.1% NaF）浸提后加入一定量掩

5、蔽劑及消泡劑并調(diào)節(jié)樣液鹽酸濃度，在既定HG-AFS條件下測(cè)定Sb(Ⅲ)含量。無機(jī)銻含量減去Sb(Ⅲ)含量為Sb(Ⅴ)含量。在該方法下無機(jī)銻在0.5~40 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)為0.9991。以3SD/k計(jì)算，檢出限為0.450μg/kg。6次平行測(cè)定RSD為2.31%，基質(zhì)加標(biāo)回收率為90.97~100.10%。Sb(Ⅲ)在0.5~40ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)為0.9996，以3SD/k計(jì)算，檢出

6、限為0.400μg/kg，6次平行測(cè)定RSD為3.51%，基質(zhì)加標(biāo)回收率范圍為84.54-89.05%。
　　3.建立了固相萃取-抑制電導(dǎo)離子色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中PAT代謝產(chǎn)物-酒石酸的方法。在該方法下，酒石酸在80.00~1000.00ng/mL線性范圍內(nèi)的線性相關(guān)系數(shù)為0.9989。以3倍信噪比計(jì)算得酒石酸檢出限為50μg/L，基質(zhì)加標(biāo)回收率介于84.39%~87.23%，RSD<6.53%。
　　4.研究了PAT在鯽魚中

7、的代謝規(guī)律以及銻形態(tài)變化規(guī)律。首先通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定PAT檢測(cè)和代謝規(guī)律研究應(yīng)以銻為指標(biāo)；然后分析了兩種PAT藥浴劑量藥浴24h過程中，鯽魚各組織中總銻、無機(jī)銻、Sb(Ⅲ)以及Sb(Ⅴ)的分布和含量變化。結(jié)果表明：PAT中Sb(Ⅲ)進(jìn)入機(jī)體后主要以無機(jī)銻形式存在，無機(jī)銻主要以Sb(Ⅲ)存在，肝臟是銻主要的靶器官；銻在鯽魚中分布為肝胰腺＞鰓＞血液＞肌肉；Sb(Ⅲ)主要在肝臟和血液中轉(zhuǎn)化為Sb(Ⅴ)；鯽魚各個(gè)組織中銻的富集量對(duì)PAT藥浴染毒劑量

8、幾乎不呈現(xiàn)劑量-反應(yīng)關(guān)系，且各組織對(duì)銻的富集存在飽和現(xiàn)象。在80mg/L酒石酸銻鉀藥浴后的120d代謝過程中，鯽魚各組織中的銻殘留量及其變化表明：鯽魚四個(gè)組織中總銻呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，并且前8d代謝相對(duì)較快，8d后代謝相對(duì)較慢；四個(gè)組織對(duì)銻的代謝速度不相同，按其速率大小為肝胰腺＞鰓＞血液＞肌肉，可見對(duì)銻富集力度越大的組織，其銻代謝速度也越快。代謝120d后，鰓、血液、肌肉中總銻殘留量與背景值相差不大，但肝胰腺中總銻殘留量仍為背景值的8倍左右