亞甲基藍檢測方法及其在鯽魚體內代謝變化研究.pdf

1、抗真菌亞甲基藍是一種人工合成的噻嗪類染料，具有抗茵消毒作用，在水產養(yǎng)殖中用作抗菌藥物，可以治療淡水魚類的小爪蟲病、斜管蟲病、水霉病和凡納濱對蝦幼體粘臟病，也可降低魚類運輸中的死亡率。研究表明，亞甲基藍及其代謝物對動物體有致突變等毒性作用，所以在美國、日本等國家，亞甲基藍被禁止用于水產養(yǎng)殖，在國內也未被批準使用。目前關于亞甲基藍在水產品中殘留檢測的液質方法研究較少，其代謝變化及目前的使用情況，還未有文獻報導，所以本文研究了其在水產品中的殘

2、留檢測方法及代謝變化，并作了江蘇省內其使用情況的初步調查。具體內容包括三個方面:
　　1.水產品中亞甲基藍及代謝物檢測方法的研究。建立了超高效液相色譜-電噴霧串聯質譜法同時檢測水產品中亞甲基藍及其代謝物含量的分析方法。經過條件優(yōu)化，試樣用10mL乙腈提取3次，并在體系中添加鹽酸羥胺、對甲苯磺酸等提高提取效率，提取液經對丙磺酸固相萃取小柱凈化，按V（乙腈）∶V（乙酸銨，1mol·L-1）=1∶1洗脫，采用ThermoHypersil

3、C18色譜柱，以甲醇和0.2％甲酸為流動相進行梯度洗脫分離，電噴霧離子源(ESI)，正離子模式，采用選擇反應監(jiān)測（SRM）掃描模式。結果表明，亞甲基藍及代謝物（天青A、天青B、天青C）在0.50～100.00μg·L-1范圍內線性關系良好，相關系數R＞0.99，在10min內實現分離，3個加標水平(2μg·kg-1、4μg·kg-1、10μg·kg-1)的平均回收率為74.23％～94.40％(n=6)，相對標準偏差(RSD)為1.13

4、％～％10.28％,檢測限(LOD)為0.40～0.60μg·kg-1，定量限(LOQ)為2.00μg·kg-1。該方法簡便快捷、準確度高，易于推廣應用，可作為快速測定水產品中亞甲基藍及其代謝物的有效方法。
　　2.亞甲基藍在鯽魚體內的代謝變化研究。使用不同濃度（1mg·L-1和10mg·L-1）的亞甲基藍原藥溶液，和不同的藥浴時間（10min和30min）對鯽魚進行藥浴，研究其代謝變化。結果表明:當用亞甲基藍藥浴浸泡鯽魚后，以原

5、藥的形式被鯽魚從腮部和口腔、皮膚等部位吸收，在體內一邊富集，一邊開始分解和排泄，4種目標物（亞甲基藍、天青A、天青B、天青C）在鯽魚體的三個不同部位的分布量多少為腮部＞肝臟＞肌肉，且肌肉中以天青A、天青B為主要形式，肝臟中以亞甲基藍、天青A、天青B3種物質為主要形式，腮中亞甲基藍為主要形式存在。藥浴時間對目標物質殘留量的影響要大于濃度的影響。
　　3.對于江蘇省部分城市水產品中亞甲基藍及其代謝物殘留狀況初步調查。結果表明，大部分水