氟維斯群(ICI 182,780)逆轉(zhuǎn)P-gp介導(dǎo)乳腺癌多藥耐藥的體內(nèi)外研究.pdf

1、乳腺癌作為一種常見的惡性婦科腫瘤，是導(dǎo)致女性腫瘤患者死亡的最主要原因之一。阿霉素和紫杉醇是目前廣泛應(yīng)用于臨床治療乳腺癌的一線化療藥物,而化療引起的多藥耐藥(MDR)是臨床腫瘤治療的一大困境，往往提示疾病預(yù)后差。P-糖蛋白(P-gp)是屬于腺苷三磷酸結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族的一種已知跨膜糖蛋白能作為ATP依賴的藥物泵外排一系列底物，是腫瘤多藥耐藥的經(jīng)典機(jī)制。
　　 氟維斯群(Fulvestrant，ICI182，780)是一

2、類新型的純雌激素受體(ER)拮抗劑，在之前研究中，我們利用ER-α陰性的BCap37細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染ER-α表達(dá)載體得到ER-α陽性的BCap37細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)氟維斯群能夠增強(qiáng)ER-α陽性BCap37細(xì)胞對(duì)抗微管類藥物的化療敏感性，聯(lián)合使用氟維斯群能夠顯著逆轉(zhuǎn)雌激素受體介導(dǎo)的化療耐藥。本課題我們主要利用起源于BCap37細(xì)胞的乳腺癌耐藥細(xì)胞株Bats-72和Bads-200探討氟維斯群逆轉(zhuǎn)P-gp介導(dǎo)的非雌激素受體依賴的腫瘤多藥耐藥的體內(nèi)外作用

3、及其機(jī)制。
　　 一系列的體外實(shí)驗(yàn)表明氟維斯群可以明顯增強(qiáng)阿霉素和紫杉醇對(duì)雌激素受體陰性多藥耐藥細(xì)胞株Bats-72、Bads-200和KBv200的細(xì)胞毒性，且呈劑量正相關(guān)。與其他P-gp調(diào)節(jié)劑相比，氟維斯群的體外逆轉(zhuǎn)效能與維拉帕米相近，比他莫昔芬有效。同時(shí)氟維斯群能增強(qiáng)阿霉素誘導(dǎo)的Bats-72和Bads-200細(xì)胞的細(xì)胞凋亡、G2/M細(xì)胞周期阻滯以及cyclin B1蛋白表達(dá)水平。蛋白印跡檢測(cè)證實(shí)單獨(dú)處理或聯(lián)合使用阿霉素和

4、氟維斯群均不會(huì)改變P-gp的表達(dá)水平。共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)氟維斯群增加Bats-72和Bads-200細(xì)胞內(nèi)阿霉素的聚積和滯留。這提示氟維斯群的逆轉(zhuǎn)作用不是通過下調(diào)P-gp的表達(dá)水平實(shí)現(xiàn)，而主要?dú)w因于抑制P-gp介導(dǎo)的藥物外排。氟維斯群不僅可以促使阿霉素在Bats-72和Bads-200細(xì)胞內(nèi)聚積還能促使阿霉素進(jìn)入細(xì)胞核，表明氟維斯群還能促使阿霉素到達(dá)細(xì)胞核靶點(diǎn)位置，這可能是氟維斯群逆轉(zhuǎn)阿霉素耐藥的另一種潛在機(jī)制。P-gp的APT酶檢測(cè)

5、發(fā)現(xiàn)氟維斯群能刺激APT酶的活性，證實(shí)氟維斯群是作為P-gp的轉(zhuǎn)運(yùn)底物從而抑制P-gp藥物外排泵作用。體內(nèi)Bats-72移植瘤實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明聯(lián)合使用氟維斯群可以增強(qiáng)紫杉醇的抗腫瘤效果，這提示氟維斯群具備較好的體內(nèi)逆轉(zhuǎn)效能。以上結(jié)果說明氟維斯群是一種有效的選擇性P-gp調(diào)節(jié)劑，能通過抑制P-gp外排泵作用顯著逆轉(zhuǎn)P-gp介導(dǎo)的多藥耐藥，且同雌激素受體表達(dá)與否無關(guān)。因此氟維斯群不僅僅能調(diào)節(jié)或抑制乳腺癌細(xì)胞雌激素受體介導(dǎo)的信號(hào)通路，還可應(yīng)用于