姜黃素對酒精聯(lián)合四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討姜黃素對酒精聯(lián)合四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，并初步探討其機(jī)制。
　　方法：制備小鼠急性肝損傷模型。健康雄性BALB/C小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只。正常對照組腹腔注射橄欖油，尾靜脈注射PBS，葡萄糖灌胃。四氯化碳模型組，腹腔注射四氯化碳（CCl4），尾靜脈注射PBS，葡萄糖灌胃。酒精聯(lián)合四氯化碳模型組，腹腔注射四氯化碳（CCl4），尾靜脈注射PBS，酒精灌胃。低劑量姜黃素給藥組腹腔注射四氯化碳（CCl4

2、），尾靜脈注射1×10-4M姜黃素，酒精灌胃。高劑量姜黃素給藥組腹腔注射四氯化碳（CCl4），尾靜脈注射3×10-4M姜黃素，酒精灌胃。給藥兩個星期后，檢測生化指標(biāo)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、白蛋白(Alb)以及總膽紅素（TBIL）在動物模型體內(nèi)的變化；利用HE染色法和Masson三色染色法觀察肝組織病理學(xué)變化；利用Western Blot技術(shù)檢測腫瘤壞死因子α(TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）和α-平滑肌肌

3、動蛋白(α-SMA)表達(dá)水平；利用免疫熒光染色法觀察CHOP的表達(dá)；透射電子顯微鏡觀察肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：成功建立肝損傷模型，單純四氯化碳模型組與對照組相比小鼠血清中AST、ALT、TBIL含量顯著增高（P＜0.05），Alb含量顯著降低（P＜0.05）；HE染色和Masson三色染色表明，肝臟損傷；Western Blot結(jié)果顯示肝組織中TNF-α、TGF-β和α-SMA的表達(dá)增強(qiáng)。酒精聯(lián)合四氯化碳組與對照組和四氯化碳模

4、型組相比小鼠血清中AST、ALT、TBIL含量顯著增高（P＜0.05），Alb含量顯著降低（P＜0.05）；HE染色和Masson三色染色表明，肝臟損傷十分嚴(yán)重，出現(xiàn)纖維隔；Western Blot結(jié)果顯示肝組織中TNF-α、TGF-β和α-SMA的表達(dá)程度更強(qiáng)。高劑量姜黃素給藥組中，AST、ALT、TBIL含量明顯降低并且抑制了膠原纖維的形成；肝臟組織中蛋白TNF-α、TGF-β和α-SMA的表達(dá)與模型組相比明顯減少。低劑量姜黃素給藥

5、組與酒精聯(lián)合四氯化碳模型組相比效果不明顯。熒光免疫組化結(jié)果顯示，酒精聯(lián)合四氯化碳模型組CHOP表達(dá)量很高，高劑量姜黃素顯著抑制了CHOP表達(dá)量。電子顯微鏡結(jié)果顯示，酒精聯(lián)合四氯化碳模型組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)損傷嚴(yán)重，高劑量姜黃素改善了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)損傷情況。
　　結(jié)論：姜黃素通過減少TNF-α、TGF-β和α-SMA的表達(dá)而減少HSC的激活和EMC的產(chǎn)生,從而減輕或阻止肝纖維化的發(fā)展。并且姜黃素通過降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力，保護(hù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，對酒精聯(lián)合四氯化碳誘導(dǎo)的肝