RVM區(qū)神經(jīng)降壓肽受體2(NTS2)在痛覺(jué)調(diào)制中的作用研究.pdf

1、延腦頭端腹內(nèi)側(cè)區(qū)(rostral ventromedial medulla, RVM)這一特殊的中樞核群是痛覺(jué)調(diào)制環(huán)路中一個(gè)重要結(jié)構(gòu),RVM能整合由PAG和大腦前葉下傳的情緒和感覺(jué)信號(hào),投射到脊髓背角,調(diào)制傷害性感受信號(hào)的上傳,并與慢性痛時(shí)痛過(guò)敏的產(chǎn)生有關(guān)。因?yàn)镽VM是起源于PAG的內(nèi)源性下行抑制系統(tǒng)最重要的接替核團(tuán),因此,研究者們多認(rèn)為RVM活化后僅起到抑制脊髓傷害性信息傳遞的作用,但后來(lái)發(fā)現(xiàn)電刺激或化學(xué)刺激RVM也可易化脊髓活動(dòng)和后

2、角神經(jīng)元對(duì)傷害性刺激的反應(yīng)。
　　已經(jīng)證實(shí),神經(jīng)降壓肽(NT)及其受體(NTS)在RVM區(qū)均有表達(dá),并且NTS2的mRNA水平明顯高于NTS1,NTS2基因缺陷的小鼠對(duì)傷害性刺激的反應(yīng)也明顯弱于NTS1基因缺陷及野生型小鼠,提示該兩種受體在痛覺(jué)調(diào)制上具有不同的效應(yīng),而 NTS2在NT的痛覺(jué)調(diào)制中可能起著更重要的作用。。
　　本研究利用動(dòng)物行為學(xué)方法結(jié)合形態(tài)學(xué)方法觀察了RVM區(qū)NTS2受體在坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(CCI)模型

3、中的表達(dá)變化,通過(guò) RVM區(qū)注射神經(jīng)降壓肽受體拮抗劑SR142948A觀察其對(duì)RVM區(qū)NTS2受體表達(dá)和大鼠痛閾的影響,從而初步探討RVM區(qū)NTS2受體在痛覺(jué)調(diào)制中的作用。
　?、?RVM區(qū)NTS2受體在CCI模型中的表達(dá)變化
　　實(shí)驗(yàn)用坐骨神經(jīng)慢性壓迫傷致神經(jīng)病理性痛模型大鼠,分別以清醒大鼠對(duì)輻射熱刺激和機(jī)械性觸覺(jué)刺激的縮腿潛伏期和機(jī)械閾值為指標(biāo),將實(shí)驗(yàn)大鼠分為CCI模型組、假手術(shù)組、正常對(duì)照組,分別在坐骨神經(jīng)結(jié)扎術(shù)前3天

4、和結(jié)扎術(shù)后14天連續(xù)監(jiān)測(cè)大鼠痛閾及行為變化,并選擇術(shù)后1、4、7、14天的大鼠,采用免疫組化方法觀察 RVM區(qū)NTS2受體的表達(dá)變化與大鼠熱痛敏和觸誘發(fā)痛間的關(guān)系;
　　結(jié)果發(fā)現(xiàn):
　　CCI模型組RVM區(qū)NTS2受體表達(dá)增加可顯著增強(qiáng)神經(jīng)病理性痛大鼠的熱痛敏和觸誘發(fā)痛現(xiàn)象,其促進(jìn)作用分別在術(shù)后第4天(熱痛敏)和術(shù)后第7天(觸誘發(fā)痛)達(dá)到最大,表現(xiàn)為痛閾最低。同時(shí)免疫組化結(jié)果顯示:術(shù)后第4天,光鏡水平下CCI模型組表達(dá)NTS

5、2免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量明顯增加,與假手術(shù)組術(shù)后4天和正常組大鼠相比有顯著差異(P<0.01),同時(shí)術(shù)后第1和7天時(shí),CCI模型組NTS2免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量較假手術(shù)組相比也有明顯差異(P<0.05);并且免疫陽(yáng)性細(xì)胞的平均吸光度與假手術(shù)組比較在第1和4天有顯著差異(P<0.01),第7天有明顯差異(P<0.05)。
　　Ⅱ.RVM區(qū)注射SR142948A對(duì)NTS2受體表達(dá)和大鼠熱痛閾的影響
　　實(shí)驗(yàn)選用術(shù)后第4天(大鼠痛閾最低)CC

6、I模型組大鼠于RVM區(qū)微量注射NT受體第二代拮抗劑SR142948A或生理鹽水,以淺麻醉狀態(tài)下大鼠對(duì)輻射熱刺激的術(shù)側(cè)縮腿潛伏期和甩尾潛伏期為指標(biāo),觀察SR142948A注射后對(duì)NTS2受體表達(dá)和大鼠行為學(xué)的影響。
　　結(jié)果發(fā)現(xiàn):
　　RVM區(qū)微量注射SR142948A后,大鼠痛閾較注射前有明顯增高。并且發(fā)現(xiàn):SR12948A濃度為1nmol時(shí),大鼠痛閾增高,峰值出現(xiàn)在注射后第15min,與注射前基礎(chǔ)痛閾相比有明顯差異(P<0

7、.05);SR142948A濃度為10nmol時(shí),峰值出現(xiàn)在注射后第10min,與注射前基礎(chǔ)痛閾相比有明顯差異(P<0.05)。提示隨著SR142948A的濃度的增加,痛閾增高峰值出現(xiàn)的時(shí)間發(fā)生左移現(xiàn)象。同時(shí)免疫組化結(jié)果顯示, RVM區(qū)NTS2受體的表達(dá)與注射前和生理鹽水對(duì)照組均無(wú)明顯差異。
　　綜上所述,本研究在核團(tuán)水平和細(xì)胞水平觀察到RVM區(qū)的NTS2在神經(jīng)病理痛條件下免疫陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)上調(diào),而且RVM區(qū)注射SR142948