Apelin在大鼠中樞痛覺調(diào)制中的作用及其機制的實驗研究.pdf

1、目的：以輻射熱刺激甩尾法為疼痛模型，旨在探討apelin在大鼠中樞痛覺調(diào)制中的作用及可能的作用機制。 方法 1.痛閾測定：雄性SD大鼠，以輻射熱引起大鼠甩尾，以大鼠甩尾反應(yīng)的潛伏期(tail-filck latency，TFL)作為痛反應(yīng)指標。分別向側(cè)腦室微量注射生理鹽水(NS)、嗎啡(Morphine) 和apelin，觀察注藥后60 min內(nèi)大鼠痛閾的變化情況。 2.腦內(nèi)nNOS表達的檢測：雄性SD大鼠，隨機

2、分為NS組、apelin組，采用免疫熒光方法在激光共聚焦顯微鏡下觀察給藥后30 min大鼠尾核、海馬及皮層nNOS表達的變化。 3.血清和腦內(nèi)NO、總NOS測定：雄性SD大鼠，分別向大鼠側(cè)腦室微量注射NS和apelin，給藥后30min斷頭取血取腦，應(yīng)用硝酸還原酶法測定血清及腦內(nèi)NO和總NOS含量的變化。 4.血漿和腦內(nèi)cAMP和cGMP測定：雄性SD大鼠，分別向大鼠側(cè)腦室微量注射NS和apelin，給藥后30min斷頭

3、取血取腦，應(yīng)用放射免疫方法測定大鼠血漿及腦內(nèi)cAMP和cGMP含量的變化。 結(jié)果 1.側(cè)腦室微量注射apelin后10～30min大鼠痛閾與NS對照組相比顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，30min后大鼠痛閾逐漸回升，至60 min時大鼠痛閾仍低正常水平。 2.側(cè)腦室注射apelin后，激光共聚焦顯微鏡觀察到在關(guān)注腦區(qū)nNOS表達均發(fā)生變化。FITC標記的nNOS呈現(xiàn)綠色熒光顆粒分布于細胞胞漿中，為典型

4、的細胞質(zhì)分布；同時PI染色，細胞核為紅色熒光。整個圖像細胞形態(tài)完整，細胞核與細胞質(zhì)的熒光色彩標識清晰可見。并且尾核及海馬nNOS神經(jīng)元較NS對照組表達明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05～0.01)。 3.側(cè)腦室微量注射apelin后，大鼠血清、尾核及海馬中NO和NOS含量明顯降低，與NS對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05～0.01)。 4.側(cè)腦室微量注射apelin后，大鼠血漿、尾核、海馬中cAMP含量升高

5、，cGMP含量降低，與NS對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05～0.01)。 結(jié)論 1.側(cè)腦室微量注射apelin顯著降低大鼠痛閾，使大鼠痛覺敏感化。 2.Apelin的這種痛覺敏感化作用至少部分是通過尾核、海馬等核團的調(diào)控作用實現(xiàn)的。 3.側(cè)腦室微量注射apelin明顯提高大鼠尾核、海馬及血漿中cAMP水平，降低大鼠尾核、海馬中NO和NOS及血清中NO的含量，同時使大鼠尾核、海馬及血漿中cGMP含