Apelin-13對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎的防治作用及其機(jī)制.pdf

1、目的:觀察Apelin-13對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎的防治作用并探討其可能的機(jī)制。
　　方法:采用周圍神經(jīng)髓鞘抗原(P257-81)注射入Lewis大鼠后肢足墊誘導(dǎo)EAN模型。Lewis雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、EAN模型組和Apelin-13處理組。Apelin-13處理組于免疫當(dāng)天至第15天每天尾靜脈注射Apelin-13(0.1mg/kg)。觀察各組大鼠發(fā)病情況和坐骨神經(jīng)組織病理學(xué)變化及炎癥細(xì)胞浸潤情況。制備脾臟單個(gè)淋巴細(xì)

2、胞懸液，加入刀豆蛋白A、脂多糖和周圍神經(jīng)髓鞘抗原(P257-81)不同刺激物孵育48小時(shí)后，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖。采用酶聯(lián)免疫(ELISA)法檢測(cè)大鼠血漿中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、干擾素-γ（IFN-γ）、白細(xì)胞介素-4(IL-4)和轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)的水平，采用實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot檢測(cè)淋巴結(jié)中TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-4和TGF-β mRNA和

3、蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)EAN模型組大鼠坐骨神經(jīng)神經(jīng)束間和神經(jīng)束內(nèi)有大量的炎癥細(xì)胞浸潤，存在局灶性脫髓鞘現(xiàn)象。與對(duì)照組比較，EAN模型組脾臟淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)增殖以及LPS和周圍神經(jīng)髓鞘抗原(P257-81)誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖水平均顯著增高（均P＜0.05）。與對(duì)照組比較，EAN模型組大鼠血漿中TNF-α、IL-6和IFN-γ水平顯著升高，而血漿中IL-4和TGF-β的水平顯著降低（均P＜0.05）。與對(duì)照組比較，EAN模型組大鼠淋

4、巴結(jié)中TNF-α、IL-6和IFN-γ mRNA和蛋白的表達(dá)顯著升高，而IL-4和TGF-β mRNA和蛋白的表達(dá)顯著降低(均P＜0.05)。(2)與EAN模型組比較，Apelin-13處理組大鼠最初發(fā)病時(shí)間明顯延長，高峰期臨床評(píng)分顯著降低（P＜0.05），坐骨神經(jīng)神經(jīng)束間和神經(jīng)束內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少，脫髓鞘現(xiàn)象明顯減少。與EAN模型組相比，Apelin-13處理組的基礎(chǔ)細(xì)胞增殖以及LPS和周圍神經(jīng)髓鞘抗原(P257-81)誘導(dǎo)的細(xì)胞

5、增殖水平均顯著降低（均P＜0.05）。與EAN模型組比較，Apelin-13處理組大鼠血漿中TNF-α、IL-6和IFN-γ水平顯著降低，而血漿中IL-4和TGF-β的水平顯著增加（均P＜0.05）。與對(duì)照組比較，Apelin-13處理組大鼠淋巴結(jié)中TNF-α、IL-6和IFN-γ mRNA和蛋白的表達(dá)顯著降低，而IL-4和TGF-βmRNA和蛋白的表達(dá)顯著升高(均P＜0.05)。
　　結(jié)論:Apelin-13對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神