神經(jīng)激肽-1受體在GERD豚鼠咳嗽反射敏感性增高中的作用.pdf

1、目的：探討胃食管反流性疾病(gastroesophageal reflux disease，GERD)豚鼠模型肺及延髓中神經(jīng)激肽-1受體（neurokinin-1 receptor，NK-1R）的表達(dá)及與豚鼠咳嗽反射敏感性(cough reflex sensitivity，CRS)之間的關(guān)系。
　　材料與方法：取CRS正常的健康雄性Hartly豚鼠隨機(jī)分為五組:空白組，生理鹽水組，模型組，模型+肉毒毒素-A(botulinum t

2、oxin-A，BTX-A)組，模型+生理鹽水組。模型組豚鼠食管下端灌注含0.5％胃蛋白酶的鹽酸溶液(pH=0.86)，7-8滴/min，20min/天，連續(xù)15天。食管下端酸性溶液灌注聯(lián)合氣道BTX-A注射構(gòu)建模型+BTX-A組。造模完成后再次測量豚鼠CRS，并通過免疫組織化學(xué)染色法檢測肺組織NK-1R的表達(dá)，免疫組織化學(xué)熒光染色法及Westernblot法檢測腦組織延髓中NK-1R的表達(dá)改變。
　　結(jié)果：(1)食管下端多次酸性溶

3、液灌注建立的GERD模型組豚鼠與對照組相比，其咳嗽次數(shù)增加（51.17±10.19vs29.50±13.40，51.17±10.19vs26.80±9.83，P＜0.05），潛伏時間縮短（8.24±4.73vs38.17±9.91，8.24±4.73vs31.92±4.78，P＜0.05），即氣道CRS增高。模型+BTX-A組較模型組咳嗽次數(shù)減少（23.33±7.53vs51.17±10.19，P＜0.05），潛伏時間未見明顯改變（11

4、.76±3.29vs8.24±4.73，P＞0.05）。(2)免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果示肺組織及腦內(nèi)延髓迷走復(fù)合體(dorsal vagal complex，DVC)中有NK-1R表達(dá)改變。模型組肺組織及延髓DVC中NK-1R相較于空白組及生理鹽水組，其免疫陽性物質(zhì)表達(dá)增多（108.48±25.71vs38.54±17.62，4.99±0.44vs1.96±0.16，P＜0.05），反應(yīng)增強(qiáng)。模型+BTX-A組與模型組相比，肺組織及DV

5、C內(nèi)NK-1R表達(dá)明顯下降(21.59±13.45vs108.48±25.71，1.32±0.11vs4.99±0.44，P＜0.05)。(3) Western blot結(jié)果顯示模型組延髓NK-1R蛋白表達(dá)相較于空白及生理鹽水組，其相對表達(dá)量增加(1.00±0.43vs0.46±0.34，1.00±0.43vs0.50±0.37，P＜0.05)，氣道注射BTX-A后與模型組相比，NK-1R蛋白相對表達(dá)量下降（0.49±0.33vs1.0