HGF基因修飾骨髓間充質(zhì)干細胞對四氯化碳所致慢性肝損傷的治療作用.pdf

1、該研究利用四氯化碳所致慢性肝損傷的模型,觀察了高表達HGF的骨髓間充質(zhì)干細胞對慢性肝損傷的治療作用,為基因修飾干細胞治療損傷性疾病提供了實驗依據(jù).骨髓干細胞中包括基質(zhì)細胞來源的間充質(zhì)干細胞(MSC)和造血干細胞(HSC)等多種干細胞成份.我們擴增并純化了攜帶綠色熒光蛋白基因的腺病毒載體(Ad-GFP);分離純化了人骨髓MSC和臍帶血CD34+細胞;利用Ad-GFP評價了腺病毒感染MSC和HSC這兩種不同類型成體干細胞的效率.實驗結(jié)果表明

2、,在MOI為150時,腺病毒感染MSC的效率達到98.38﹪,HSC為13.55﹪.Ad-GFP感染造血細胞來源的細胞系Mo7e,Jurkat細胞的效率也較低.研究表明,腺病毒感染細胞的過程是通過細胞膜上特異性受體(CAR)介導(dǎo)的.我們應(yīng)用RT-PCR的方法檢測MSC和HSC細胞腺病毒特異性受體(CAR)表達.結(jié)果顯示,MSC高表腺病毒特異性受體(CAR),而HSC的CAR表達較低,表明腺病毒感染骨髓MSC和HSC的效率與CAR的表達呈

3、相關(guān)性.鑒于骨髓中MSC具有向肝細胞分化的潛能和腺病毒的高感染效率,我們選擇MSC作為攜帶HGF基因治療慢性肝損傷的靶細胞.我們分離并擴增了雄性大鼠的骨髓MSC;利用攜帶HGF的重組腺病毒感染MSC,利用ELISA方法檢測了骨髓MSC表達外源性HGF基因的能力.總結(jié):骨髓MSC高表達腺病毒特異性受體CAR,因此,腺病毒能夠有效感染MSCs;腺病毒介導(dǎo)HGF基因在骨髓MSC中高表達;HGF基因修飾的MSC能夠參與肝再生,對慢性肝損傷具有較