肝動脈栓塞術(shù)與血管生成相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分兔VX2肝癌肝動脈栓塞改良模型的建立 目的探討兔肝血管的解剖、栓塞插管技術(shù)的改良及VX2肝癌的超聲、CT的成像的特點，并觀察病理學(xué)改變。 方法選用VX2腫瘤細(xì)胞株，10只新西蘭兔采用開腹法將瘤塊埋入兔肝左中葉法建立兔VX2肝癌模型，于接種后第14天行肝動脈改良栓塞，均術(shù)后7天行超聲、CT掃描，并對腫瘤標(biāo)本行HE染色。 結(jié)果10只兔肝癌栓塞改良模型均成功建立，VX2肝癌在超聲上表現(xiàn)為低回聲的腫塊，彩色多普勒

2、可見腫瘤組織周邊血供減少，腫瘤區(qū)碘油沉積所形成的環(huán)狀斑片、點狀強回聲反射；CT掃描顯示栓塞后腫瘤周邊區(qū)碘油充填。 結(jié)論兔肝癌血管解剖與人類相似，兔VX2肝癌的超聲表現(xiàn)類似于人原發(fā)性肝癌，用改良的穿刺方法成功建立了兔VX2肝癌肝動脈栓塞模型，為研究肝癌介入治療提供了可靠的實驗基礎(chǔ)。 第二部分兔VX2肝癌栓塞后腫瘤血管生成的變化 目的在兔VX2肝癌栓塞改良模型上觀察栓塞后腫瘤血管生成的變化。 方法20只新西蘭

3、大白兔，隨機分栓塞組(n=10)和對照組(n=10)。于接種后14天用改良的穿刺技術(shù)經(jīng)肝固有動脈注入超液化碘油(栓塞組)或等量生理鹽水(對照組)。術(shù)后7天行CT掃描檢查，觀察腫瘤栓塞后CT的表現(xiàn)和病理特征并取腫瘤，免疫組織化學(xué)方法檢測腫瘤組織微血管密度(MVD)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)蛋白的表達(dá)。 結(jié)果10只肝癌模型和10只栓塞模型均成功建立，栓塞后腫瘤周邊區(qū)碘油呈環(huán)形填充。栓塞組MVD(28.5±8.2)與對照組(21.7

4、±6.5)比較差異有非常顯著(t=3.083,P＜0.01)；VEGF蛋白栓塞組(0.162±0.018)與對照組(0.142±0.01)對比較差異有非常顯著(F3.075，P＜0.01)表達(dá)水平顯著增高；在栓塞組和對照組，VEGF蛋白的表達(dá)與MVD呈正相關(guān)(r分別為0.69和0.72,P＜0.05)。 結(jié)論經(jīng)肝動脈栓塞后可能使腫瘤組織的缺血缺氧而導(dǎo)致VEGF的表達(dá)增加，促進(jìn)腫瘤血管的生成，如果將介入栓塞與抗血管生成治療相結(jié)合，

5、可望提高栓塞治療效果。 第三部分血管生成抑制劑TNP-470碘油栓塞對兔VX2肝移植瘤生長及新生血管的作用 目的研究血管生成抑制劑TNP-470碘油栓塞對兔VX2肝移植瘤生長，微血管密度(MVD)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)的影響。 方法40只新西蘭大白兔肝內(nèi)種植14天后，隨機分為5組，經(jīng)改良的肝固有動脈插管分別給予不同的處理，(A組)3％酒精溶劑灌注組，(B組)單純TNP-470灌注組，(C組)單純的碘油

6、栓塞組(D組)3％酒精溶劑+碘油栓塞組，(E組)TNP-470+碘油栓塞組。TNP-470的用量為3mg/kg。治療7天后，采用二維超聲檢測腫瘤的大小，計算腫瘤的生長率，病理觀察腫瘤的壞死率，用免疫組化的方法檢測腫瘤的MVD和VEGF蛋白的表達(dá)，并用RT-PCR檢測VEGFmRNA的表達(dá)。 結(jié)果治療7天后，各組腫瘤體積分別為(1.441±0.26)cm3、(1.372±0.28)cm3、(0.578±0.16)cm3和(0.52

7、3±0.12)cm3，各栓塞治療組，腫瘤生長受到了明顯抑制；單純的碘油栓塞組及酒精+碘油栓塞后殘余區(qū)的MVD有明顯的升高，兩者分別為：28.6±10.6；28.2±9.3，高于陰性對照A組MVD為21.8±6.9相比統(tǒng)計學(xué)有顯著意義(P＜0.05)；兩組的VEGF表達(dá)強度分別為0.162±0.018和0.164±0.020高于陰性對照A組VEGF表達(dá)強度為0.141±0.01(P＜0.05)；TNP-470+碘油栓塞組殘余瘤區(qū)的MVD減

8、低，VEGF的表達(dá)沒有明顯變化，兩者分別為15.1±3.2和0.165±0.019，MVD與VEGF表達(dá)強度之間不存在相關(guān)。TNP-470+碘油栓塞組腫瘤壞死率大于單純碘油栓塞及酒精+碘油栓塞組(P＜0.05)，分別為85.5％±4.0％，75％±7.8％和75.9％±11.4％。栓塞后VEGFmRNA表達(dá)水平顯著增高，且TNP-470不影響VEGFmRNA的表達(dá)。 結(jié)論TNP-470+碘油栓塞可以抑制腫瘤的生長，增加腫瘤的壞死