蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷和亞低溫保護作用.pdf

1、目的：蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷是重度腦動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血(AmSAH)的主要死亡原因。然而AmSAH急性期腦損傷的研究卻尚未廣泛開展，目前還沒有有效的腦保護措施來減輕這種早期腦損傷。亞低溫作為一種重要的輔助治療手段可以明顯減輕腦缺血半暗帶腦組織的損傷程度。研究AmSAH急性期腦損傷的病理機理，探究亞低溫對腦組織的保護機制，對于重度AmSAH的治療有重要意義。 方法：本實驗采用SD大鼠視交叉池注血模型，研究AmSAH急性期腦

2、損傷。先根據(jù)體溫分常溫組和亞低溫兩個大組，再根據(jù)激光多譜勒腦血流儀監(jiān)測的腦血流量降低程度和持續(xù)時間將每個大組細分為中度SAH2小時、中度SAH4小時、重度SAH2小時、重度SAH4小時；中度SAH亞低溫2小時、中度SAH亞低溫4小時、重度SAH亞低溫2小時、重度SAH亞低溫4小時，共8個亞組。對照組常溫下注入0.3ml生理鹽水。測定以下指標(biāo)：1)用透射電鏡觀察海馬CA1區(qū)損傷情況；2)以極譜法測定蘋果酸+丙酮酸為底物的腦線粒體態(tài)3呼吸速

3、率、態(tài)4呼吸速率；3)以熒光素?zé)晒馑孛赴l(fā)光發(fā)測定ATP合成速率；4)以熒光法測定線粒體能化態(tài)膜電位；5)以熒光法測定線粒體活性氧的生成速率；6)以酶學(xué)方法測定線粒體Mn-SOD酶活性；7)以TBA法分別測定線粒體脂質(zhì)過氧化水平；8)以RT-PCR法測定腦組織中胞漿型磷脂A2(PLA2)和缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1)mRN表達。 結(jié)果：實驗共用90只SD大鼠，成功制作出72只SAH視交叉池注血模型，死亡12只。電鏡顯示各SAH常溫組

4、表現(xiàn)為不同程度的細胞水腫和壞死，各SAH亞低溫組細胞水腫和壞死明顯減輕。與假手術(shù)組比較：SAH4小時組產(chǎn)生活性氧顯著性上升；線粒體SOD活性無著性差異；線粒體MDA僅重度SAH損傷4小時組顯著性上升。各SAH常溫組：線粒體呼吸Ⅲ態(tài)、RCR均顯著性下降，并隨著SAH程度的加重和時間的延長呈現(xiàn)加重的趨勢；SAH4小時組ATP合成能力顯著性減少；各SAH組線粒體呼吸Ⅳ態(tài)和膜電位上升，并隨著SAH程度的加重和時間的延長呈現(xiàn)加重的趨勢，SAH4小

5、時組顯著性上升。與相同SAH程度和時間的常溫組比較：各SAH亞低溫組的呼吸Ⅳ態(tài)減少，膜電位也減少，相應(yīng)的活性氧也顯著減少，亞低溫未能增加ATP的合成能力。各SAH組Ⅳ-cPLA2轉(zhuǎn)錄水平隨著SAH程度的加重和時間的延長呈現(xiàn)加重的趨勢，其中SAH4小時組顯著性上升；與相同SAH程度和時間的常溫組比較：SAH亞低溫4小時組顯著降低Ⅳ-cPLA2mRNA水平。重度SAH組HIF-1amRNA水平顯著性上升，與相同SAH程度和時間的常溫組比較：

6、重度SAH亞低溫組HIF-1amRNA水平呈現(xiàn)著性上升。 結(jié)論：1)大鼠視交叉池注血模型研究腦動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦損傷，能夠很好地模仿蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期全腦血流變化，蛛網(wǎng)膜下腔突然的積血使全腦血流出現(xiàn)快速下降而后緩慢上升的病理生理變化，造成蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期腦組織水腫和壞死，腦損傷程度隨著蛛網(wǎng)膜下腔出血程度加重和時間延長，呈加重的趨勢。在蛛網(wǎng)膜下腔出血早期施加亞低溫可以明顯減輕蛛網(wǎng)膜下腔出血造成的腦組織水腫和壞死，

7、起到了明顯的腦保護作用，亞低溫的治療效果與時間窗有關(guān)。2)腦動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期存在的脂質(zhì)過氧化和磷脂酶破壞細胞膜的共同腦損傷機理。腦動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期的全腦血流變化形式使線粒體內(nèi)膜受損，氧化磷酸化效率降低，ATP合成受損，電子漏增加，活性氧產(chǎn)生大于清除能力，造成腦組織脂質(zhì)過氧化損傷。亞低溫能夠減少機體ATP消耗，減少電子漏，降低活性氧的產(chǎn)生，因而能減少腦組織脂質(zhì)過氧化損傷。3)在腦動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血急性期，鈣依賴