2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、辣椒是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物,病毒病是我國辣椒生產(chǎn)上主要病害之一,已鑒定出侵染為害我國辣(甜)椒的病毒有28種。廣東省是我國主要辣椒種植區(qū)之一,病毒病為害也十分嚴(yán)重,但目前還沒有對為害廣東省辣椒的病毒種類進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查與鑒定。本論文對廣東辣椒8個主要種植區(qū)進(jìn)行了調(diào)查與病樣采集,應(yīng)用小RNA深度測序及RT-PCR檢測技術(shù),鑒定出侵染廣東辣椒的病毒種類;克隆與序列分析了辣椒葉脈斑駁病毒(Chilli veinal mottle virus,Chi

2、VMV)基因組全序列,測定了其致病性;評價了16種植物病毒藥劑對辣椒病毒病的防治效果。取得以下研究結(jié)果:
  1.在廣東省茂名、梅州、韶關(guān)、佛山、廣州、惠州、江門和湛江等8個辣椒種植區(qū)進(jìn)行調(diào)查,辣椒病毒病在這些產(chǎn)區(qū)均有不同程度的發(fā)生與為害,田間病株率一般為5%~30%,嚴(yán)重可達(dá)100%。田間病株癥狀以花葉為主,同時伴有葉片畸形、皺縮、泡狀突起等。
  2.應(yīng)用小RNA深度測序及比較分析鑒定出辣椒病樣中病毒的種類,從茂名、梅州

3、和韶關(guān)這3個地區(qū)的7個混合病樣品檢測到18種病毒,包括辣椒輕斑駁病毒(PMMoV)、甜椒(辣椒)內(nèi)源病毒(BPEV)、煙草輕型綠花葉病毒(TMGMV)、辣椒葉脈斑駁病毒(ChiVMV)、甜椒脈斑駁病毒(PVMV)、黃瓜花葉病毒(CMV)、辣椒黃化卷葉病毒(PYLCV)、辣椒環(huán)斑病毒(ChiRSV)、馬鈴薯 Y病毒(PVY)、辣椒褪綠病毒(CaCV)、蠶豆萎蔫病毒(BBWV-2)、辣椒隱癥病毒(PCV)、甜菜西方黃化病毒(BWYV)和煙草

4、脈明病毒(TVCV)、Pepper veinyellowsvirus(PeVYV)、Nicotiana tomentosiformis endogenous pararetrovirus(NtoEPRVs)、Gloxinia tospovirus(Glotospov)。根據(jù)小RNA深度測序結(jié)果及GenBank上已登錄的相應(yīng)病毒基因組序列,分別對每種病毒設(shè)計2對引物,對測序用的病樣進(jìn)行RT-PCR檢測與驗證,成功地檢測到16種病毒的目的片

5、段,僅TVCV和LycEPRVs未檢測到。上述16種病毒中,PYLCV、BWYV、PeVYV、Glotospov、NtoEPRVs等5種病毒侵染辣椒是中國大陸首次報道,其余11種侵染辣椒在國內(nèi)已有報道。廣東優(yōu)勢病毒為PVMV、ChiVMV、PVY、PMMoV及PeVYV。
  3.從每種病毒的2對引物中篩選出1對擴(kuò)增效果較好的引物,對佛山、廣州、惠州、江門、梅州、湛江、茂名、南雄等地125份辣椒病毒病疑似病樣進(jìn)行RT-PCR檢測,

6、結(jié)果顯示,124份樣品為陽性,共檢測出18種病毒。根據(jù)檢出率依次為NtoEPRVs(57%)、PMMoV(44%)、BPEV(33%)、TMGMV(31%)、ChiVMV(30%)、PVMV(30%)、PeVYV(26%)、CMV(18%)、PYLCV(17%)、ChiRSV(17%)、PVY(15%)、CaCV(14%)、BBWV-2(10%)、Glotospov(10%)、PeCPV(9%)、TMV(4%)和 BWYV(3%)。以馬

7、鈴薯 Y病毒屬病毒最多,不同地區(qū)的優(yōu)勢病毒不同。在125份病樣品中,僅9份病樣品中存在一種病毒,其余樣品中均含3種或3種以上病毒,復(fù)合侵染檢出率高達(dá)93.55%,說明廣東省辣椒病毒種類復(fù)合侵染嚴(yán)重。
  4.成功克隆ChiVMV廣東分離物(ChiVMV-GD),該病毒基因組全長為9721 nt(GenBank登錄號:KU987835),包含一個單一開放閱讀框(ORF),長度為9270 nt,編碼的多聚蛋白長度為3089個aa。與海

8、南分離物親緣關(guān)系最近(同源率96.9%),與四川、云南分離物親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。室內(nèi)人工接種,ChiVMV-GD可侵染辣椒、三生煙、普通煙;在辣椒上的癥狀主要表現(xiàn)為新葉上不規(guī)則暗綠斑駁,深綠部分通常伴有泡狀凸起,葉緣皺縮或卷曲,嚴(yán)重時葉片變小畸形、線葉;在三生煙及普通煙上均為枯斑癥狀。
  5.收集了21種不同辣椒品種,以ChiVMV-GD為毒原,比較不同辣椒品種的抗病性。結(jié)果顯示,14號辣椒品種的抗性最好,發(fā)病指數(shù)為0,其次為13號品

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