鼻咽癌甲基化譜的建立.pdf

1、鼻咽癌傾向于表觀遺傳學疾病，鼻咽癌特異性腫瘤抑制基因的啟動子區(qū)CpG島高甲基化導致其轉(zhuǎn)錄表達下調(diào)甚至沉默，喪失腫瘤抑制功能，成為鼻咽癌發(fā)病的重要機制。 為大規(guī)模篩選出鼻咽癌中因高甲基化而失活的腫瘤抑制基因，我們利用高通量的cDNA表達芯片技術，以甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑聯(lián)合脫乙酰基酶抑制劑處理鼻咽癌細胞株CNE2和HONE1，分別與未經(jīng)處理的細胞株進行差異表達的基因的篩選。整合兩張芯片處理后表達上調(diào)的基因，再以具有CpG島為條件，初步篩

2、選出鼻咽癌甲基化譜389個基因。 挑選甲基化譜中4個基因FSTL1，MAEL，TFPI2和SPARC進行驗證。利用半定量RT-PCR檢測處理前后細胞中上述基因的表達改變情況。結(jié)果顯示這4個基因經(jīng)過5-aza-dC處理后不同程度的表達上調(diào)，為鼻咽癌候選腫瘤抑制基因。 另外我們對感興趣的基因FSTL1進行DNA甲基化的驗證。發(fā)現(xiàn)鼻咽癌組織中FSTL1的表達水平顯著低于正常鼻咽組織水平；FSTL1基因啟動子區(qū)CpG島高甲基化可