C6細(xì)胞系內(nèi)腦腫瘤干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及移植瘤內(nèi)分布特點(diǎn)研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文C6細(xì)胞系內(nèi)腦腫瘤干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及移植瘤內(nèi)分布特點(diǎn)研究姓名：周旭東申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)（神經(jīng)外科）指導(dǎo)教師：李新鋼李剛20090416山東大學(xué)博士學(xué)位論文的修復(fù)DNA損傷的能力，從而對放療產(chǎn)生抵抗?；谀[瘤干細(xì)胞與非干細(xì)胞腫瘤細(xì)胞在致瘤性以及放化療抵抗能力上的差別，Singh等提出了源于CSCs的腫瘤生成模式：少量正常細(xì)胞由于基因突變等原因轉(zhuǎn)化為CSCs，CSCs通過對稱和不對稱分裂，分別產(chǎn)生少量的子代

2、CSCs和大量的腫瘤細(xì)胞，這種分裂方式持續(xù)進(jìn)行直至形成腫塊。腫塊中的CSCs所占比例較小，多數(shù)為CDl33一的腫瘤細(xì)胞，這種模式說明腫瘤中始終存在一定數(shù)量的CSCs，盡管數(shù)量可能較少，但它們在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和治療敏感性中起關(guān)鍵性的作用。作為經(jīng)典的膠質(zhì)瘤模型，多年來C6大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系被廣泛應(yīng)用于膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究。但是C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系內(nèi)腫瘤干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)方法以及腫瘤干細(xì)胞所占的比例一直存在爭議。ToruKondo等

3、應(yīng)用一種復(fù)雜的無血清DMEM培養(yǎng)基對C6細(xì)胞系內(nèi)的CSCs進(jìn)行分離培養(yǎng)，并指出其中CSCs的比例約為04％。但XueshengZheng等應(yīng)用單克隆研究，提出了C6細(xì)胞系中大部分細(xì)胞都是CSCs的觀點(diǎn)。同時(shí)，雖然越來越多的研究指出CSCs參與腫瘤的血管生成，腫瘤形成、侵襲以及復(fù)發(fā)，從而可以作為靶向治療的新的靶點(diǎn)，但尚未有對于瘤體內(nèi)腫瘤干細(xì)胞分布位置及分布特點(diǎn)的研究報(bào)道。在本實(shí)驗(yàn)中，我們應(yīng)用簡化的無血清DMEM培養(yǎng)基對C6細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)，

4、對其中的CSCs進(jìn)行了分離與鑒定，并測定了其內(nèi)CSCs所占的比例；建立了裸鼠皮下C6膠質(zhì)瘤致瘤模型，并研究了移植瘤內(nèi)CSCs的分布特點(diǎn)；提出了腫瘤內(nèi)CSCs的“爆炸式“分布假說，從形態(tài)學(xué)上，為CSCs參與腫瘤形成、侵襲以及復(fù)發(fā)提供了新的證據(jù)，為以CSCs為靶點(diǎn)的靶向治療提供了定位依據(jù)。目的1分離、培養(yǎng)C6細(xì)胞系內(nèi)的腦腫瘤干細(xì)胞，并對其進(jìn)行鑒定，測定C6細(xì)胞系內(nèi)腦腫瘤干細(xì)胞所占的比例。2建立裸鼠皮下C6膠質(zhì)瘤載瘤模型，查找其中的腫瘤干細(xì)胞