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文檔簡介
1、目的:探討姜黃素調(diào)控miR-9(Homo sapiens miR-9)的改變在抑制結(jié)腸癌細胞增殖、遷移中的作用及其機制。
方法:通過qRT-PCR的方法,分別檢測結(jié)腸癌細胞株(姜黃素處理組和DMSO對照組)中miR-9的表達水平;采用MTT、細胞劃痕法研究姜黃素調(diào)控的miR-9促進人結(jié)腸癌SW480細胞的生長侵襲能力;運用Western blot方法研究miR-9直接調(diào)控的靶基因E-cadherin。
結(jié)果:MTT結(jié)
2、果顯示,1、5、10、20μmol/L姜黃素作用結(jié)腸癌SW480細胞24h、48h、72h后,與DMSO對照組細胞相比,增殖抑制率分別為21.87%、27.81%與50.79%,29.34%、39.62%與58.38%,37.78%、32.78%與68.37%和44.81%、54.31%與72.35%,表明姜黃素可呈劑量與時間效應抑制SW480細胞增殖(P<0.05)。qRT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn),姜黃素較對照組miR-9表達下調(diào)0.64±0
3、.06倍(P<0.05)。轉(zhuǎn)染miR-9抑制劑于SW480細胞12h、24h和48h后,轉(zhuǎn)染組的抑制率分別達40.16%、51.19%與60.56%(P<0.05)。表明下調(diào)miR-9可呈時間依賴性抑制SW480細胞的增殖。細胞劃痕實驗顯示,轉(zhuǎn)染miR-9抑制劑24h與48h后,SW480細胞傷口愈合率分別為0.375±0.012和0.556±0.026,明顯慢于對照組0.538±0.012和0.803±0.008(P<0.05)。We
4、stern blot結(jié)果顯示,SW480細胞轉(zhuǎn)染miR-9抑制劑24h后,miR-9抑制劑組與miR-9抑制劑+姜黃素組的E-cadherin蛋白表達分別為0.67±0.03與1.12±0.03,較對照組0.33±0.05明顯上調(diào)(P<0.05)。表明姜黃素可通過下調(diào)miR-9,上調(diào)E-cadherin表達,抑制結(jié)腸癌細胞的增殖與遷移。
結(jié)論:
1.姜黃素可通過下調(diào)miR-9表達,抑制結(jié)腸癌SW480細胞增殖;
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