地西他濱聯(lián)合阿糖胞苷對K562細(xì)胞的增殖抑制作用研究.pdf

1、地西他濱（DCA）作為DNA甲基化特異性抑制劑已在臨床上應(yīng)用于CML的治療。但其藥物作用機(jī)制尚不明確。
　　目的：探明地西他濱對慢性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株--K562的藥物作用機(jī)制。
　　方法：培養(yǎng)K562細(xì)胞株(CML細(xì)胞株，無耐藥)，培養(yǎng)于37度CO2培養(yǎng)箱。隨機(jī)分組為空白組，DCA組，阿糖胞苷（Ara-C）組，聯(lián)合用藥組。以不同藥物濃度處理K562細(xì)胞株24h、48h、72h后，用MTT法（四甲基偶氮唑藍(lán)）篩檢藥物濃度并

2、測試藥物對K562細(xì)胞株的生長曲線的影響，記錄，分析。MTT法測試結(jié)果作為參考，取較低濃度的藥物，分別作用于K562細(xì)胞株，提取用藥24小時(shí)、48小時(shí)前后各個(gè)分組樣本的總RNA，以RT-PCR方法得出反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA，瓊脂糖膠內(nèi)跑電泳，軟件分析。Western blotting檢測用藥24小時(shí)、48小時(shí)前后各個(gè)分組K562細(xì)胞株的BIM蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：DCA抑制K562細(xì)胞增殖，抑制率隨藥物濃度升高，但與藥物濃度無明

3、顯梯度性幅度。DCA單藥組及DCA+Ara-C聯(lián)合用藥組，均顯著降低BCR/ABL的表達(dá)（ρ<0.01），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ara-C單藥組對BCR/ABL mRNA的表達(dá)無顯著影響（ρ>0.05）。單用藥物或聯(lián)合用藥對BIM蛋白表達(dá)升高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ρ<0.05）。
　　結(jié)論：Ara-C對K562細(xì)胞生存抑制率呈線性相關(guān)，DCA對K562細(xì)胞亦可抑制其生長。DCA可減少BCR/ABL的表達(dá)。DCA增加促凋亡因子BIM蛋白的表達(dá)，