VDAC在心肌細胞缺氧-復氧中的作用及機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗擬以心肌細胞缺氧/復氧(anoxia-reoxygenation,A/R)為模型,探討在心肌組織表達豐度最高的VDAC1在心肌急性損傷中的作用及機制,進一步探討心肌細胞缺血再灌注損傷機制。
　　 方法:以pSuper.Retro質粒為載體,構建shRNA VDAC1質粒。通過基因轉染和RNA干擾技術,建立心肌細胞H9C2 VDAC1蛋白正常表達組與低表達組,Western blot法測定VDAC1的蛋白表達檢測重組質

2、粒的干擾效率。實驗分四組,每組重復6次。①Control組；②A/R組；③pSuper+A/R組；④ps-VDAC1+A/R組。通過MTT法測定VDAC1各表達組心肌細胞存活率；利用流式細胞儀測定線粒體膜電位、細胞凋亡程度。
　　 結果:轉染質粒shRNA VDAC1的H9c2細胞VDAC1的蛋白表達比正常組低,表明重組質粒能下調H9c2細胞VDAC1蛋白表達。經缺氧復氧損傷,VDAC1正常表達組細胞凋亡明顯比Control組嚴

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