維生素C對新生大鼠心肌細胞缺氧復氧的保護作用.pdf

1、山東大學碩士學位論文維生素C對新生大鼠心肌細胞缺氧復氧的保護作用姓名：張兆華申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：郝芳之20040501』J爾人學碩Ij、浮似論文中文摘要目的：奉研究R在通過刈新f卜人敝心肌細胞的原代培養(yǎng)及缺氧／復氧(hypoxia／reoxygcnation，H／R)壩傷幔，詛的構建，探討維生素C(vitaminC，VitC)對缺敏復氧心肌糾JJ(!』的保護1：川殷j上機：|jII。方法：1、刈新生人鼠心zi兒兒I勻

2、JIIo一I％膚籃t’I慨進行『lj化，用差速貼壁法純化心肌細胞，用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，侮隔48小時換液。于倒置顯微鏡下觀察，剛臺盼藍染色法評價心n兒細胞質(zhì)髓。2、建立心肌細胞缺氧／復氧損傷梭掣。墩生長72小時的單層心肌細胞，換用N2飽和的低軸DMEM培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶內(nèi)充入95％N25％C02(1L／rain)持續(xù)90秒，以驅(qū)除艦內(nèi)釩氣，37℃密閉培養(yǎng)2小時，造成心肌細』弛缺氰損傷=；!掣。瓜換川飽含瓴7i的商檐DMEM培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶內(nèi)立

3、即允入95％O25％C02(1L／nlill)持續(xù)90秒，以驅(qū)除瓶內(nèi)N2，37℃密閉培養(yǎng)l小時，建立心肌自II胞缺釩擬傷模掣。3、將培養(yǎng)的心肌細胞隨機分成I；IJi紕：缺氧／復氧損傷組(H／R組)和VitC(50ug／m1)保護組(VitCftl)檢測兩組培養(yǎng)基內(nèi)乳酸脫氫酶(LDH)濃度州心肌細J也l^J鈣離J‘、內(nèi)j瞵(MDA)濃度。結(jié)果：1、心肌絀胞純度為955％，成灑二i為9503％。米貼壁前心肌細胞為圓形或橢嘲ff；。411后J