麝香保心丸對(duì)缺氧復(fù)氧心肌細(xì)胞的保護(hù)及作用機(jī)制研究.pdf

1、麝香保心丸豐治心肌缺血引起的心絞痛、胸悶及心肌梗死，是目前國(guó)內(nèi)臨床上廣泛應(yīng)用于治療冠心病的特效復(fù)方藥物。雖然該復(fù)方基于整體動(dòng)物和組織器官水平的藥理研究已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展，但遠(yuǎn)不足以闡明復(fù)方作用機(jī)制。為了進(jìn)一步闡明中藥復(fù)方的分子作用機(jī)制及其可能作用靶點(diǎn)和通路，本論文在已有工作的基礎(chǔ)上，初步探討麝香保心丸及其豐要藥效物質(zhì)對(duì)缺氧心肌細(xì)胞的保護(hù)作用，并采用基因組學(xué)技術(shù)解釋麝香保心丸治療冠心病的分子作用機(jī)制。
　　 為了研究麝香保心丸對(duì)

2、心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷的保護(hù)作用，本課題用原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞建立H/R的損傷模型，采用MTT法測(cè)定細(xì)胞的存活率以評(píng)價(jià)麝香保心丸的藥效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，麝香保心丸在30、50、100、150μg/ml劑量時(shí)，對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷有保護(hù)作用。同時(shí)，采用MTT法研究了麝香保心丸復(fù)方中的20個(gè)主要活性成分對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，人參皂苷Rb1、Rb2、蟾毒靈和麝香酮在10μM

3、時(shí)表現(xiàn)出較好活性(P＜0.05)。為了進(jìn)一步研究麝香保心丸對(duì)心肌細(xì)胞H/R損傷保護(hù)的作用機(jī)制，本研究對(duì)活性成分人參皂苷Rb1干預(yù)后的缺氧/復(fù)氧(H/R)心肌細(xì)胞進(jìn)行了基因芯片研究，差異基因表達(dá)譜結(jié)果顯示，H/R組與正常組比較有38個(gè)差異基因，16個(gè)上調(diào)，22個(gè)下調(diào);給藥組與H/R組比較有8個(gè)差異基因，6個(gè)上調(diào)，2個(gè)下調(diào);其中由人參皂苷Rb1調(diào)控的基因有5個(gè)，分別是Sec11c、Ankrd11、Zfp70911、Sco1和ND6。通過(guò)生物

4、信息學(xué)的分析將這些基因歸到所調(diào)控的通路上，兩兩對(duì)比之后推測(cè)出人參皂苷Rb1保護(hù)缺氧復(fù)氧心肌的可能途徑主要有以下幾條:通過(guò)代謝、氧化磷酸化或是帕金森疾病通路對(duì)缺氧復(fù)氧中造成的ND6低表達(dá)進(jìn)行了逆轉(zhuǎn);通過(guò)蛋白輸出通路對(duì)缺氧復(fù)氧中造成的Sec11c低表達(dá)進(jìn)行了逆轉(zhuǎn);對(duì)缺氧復(fù)氧中造成的Ankrd11、Zfp70911和Sco1的低表達(dá)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)，或是這些途徑共同調(diào)節(jié)的結(jié)果。研究結(jié)果有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
　　 本課題探討了麝香保心丸對(duì)心肌細(xì)