心肌細胞的缺氧-復氧損傷和胡黃連苷Ⅱ對心肌細胞的保護作用.pdf

1、目的：
　　 觀察乳鼠心肌細胞的缺氧損傷以及缺氧復氧條件下不同復氧時間對乳鼠心肌細胞損傷的變化以及胡黃連苷Ⅱ對乳鼠心肌細胞缺氧/復氧損傷的保護作用。
　　 方法：
　　 實驗用SD新生大鼠（出生1～3d），雌雄不拘，常規(guī)方法培養(yǎng)心肌細胞，在培養(yǎng)48h后隨機分組:正常對照組（Control組）、缺氧/復氧組(A/R組)、缺氧/復氧0.5h組、缺氧/復氧1h、組缺氧/復氧2h組、胡黃連苷Ⅱ-50組(picroside

2、Ⅱ-50)、胡黃連苷-100組(picrosideⅡ-100)、胡黃連苷Ⅱ-200組(picrosideⅡ-200)。用MTT法檢測缺氧損傷及不同復氧時間對乳鼠心肌細胞存活率的影響以及經胡黃連苷Ⅱ干預對心肌細胞存活率的影響;LDH、T-SOD、GSH/GSSG試劑盒檢測缺氧損傷及不同復氧時間下細胞損傷及胡黃連苷Ⅱ對心肌細胞的保護作用。ROS檢測胡黃連苷Ⅱ的保護作用。
　　 結果：
　　 1、細胞存活率:與正常對照組相比，

3、缺氧組心肌細胞明顯受損，缺氧組心肌細胞存活率(68.4％)較對照組心肌細胞存活率(100％)明顯降低(p＜0.05)。A/R組心肌細胞存活率(41.0％)較缺氧組心肌細胞存活率(68.4％)進一步降低(p＜0.05)。胡黃連苷Ⅱ-50，100，200組較缺氧復氧組有明顯保護作用，胡黃連苷Ⅱ-50組(66.4％)，100組(84.2％)，200組(82.0％)心肌細胞存活率較缺氧復氧組心肌細胞存活率(41.0％)明顯升高(P＜0.05)。

4、胡黃連苷Ⅱ-100組(84.2％)，200組(82.0％)較胡黃連苷Ⅱ-50組(66.4％)心肌細胞存活率明顯升高(p＜0.05)，而胡黃連苷Ⅱ-100組(84.2％)與胡黃連苷Ⅱ-200組(82.0％)心肌細胞存活率無顯著差別(P＞0.05)。
　　 2、LDH活性:與對照組（5.95±0.76 U/L）相比，缺氧組(16.78±1.08 U/L)LDH提高了183.53％;與缺氧組相比，缺氧/復氧0.5h組(31.99±1.

5、33 U/L) LDH提高了90.64％;與缺氧/復氧0.5h組相比，缺氧/復氧1h組（37.32±2.12 U/L）LDH提高了16.66％（均P＜0.05），缺氧/復氧2h組較缺氧/復氧1h組無統(tǒng)計學顯著性差異。胡黃連苷Ⅱ50組(21.04±1.68 U/L)LDH較缺氧/復氧組減少了43.62％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ100組(14.67±0.81 U/L) LDH較缺氧/復氧組減少了60.69％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ2

6、00組（14.67±0.81 U/L）LDH較缺氧/復氧組減少了65.14％(P＜0.05)。胡黃連苷Ⅱ200組較胡黃連苷Ⅱ1200組無統(tǒng)計學顯著性差異。
　　 3、GSSG活性:與對照組（35.63±1.36μmol/L）相比，缺氧組(42.27±1.50μmol/L)GSSG提高了18.64％;與缺氧組相比，缺氧/復氧0.5h組（50.86±1.16μmol/L）GSSG提高了20.32％;與缺氧/復氧0.5h組相比，缺氧/

7、復氧1h組（58.10±2.25μmol/L）GSSG提高了14.23％(P＜0.05)，缺氧/復氧2h組較缺氧/復氧1h組無統(tǒng)計學顯著性差異。胡黃連苷Ⅱ50組(48.33±1.88μmol/L) LDH較缺氧/復氧組減少了16.82％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ100組（38.77±1.57μmol/L）LDH較缺氧/復氧組減少了33.27％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ200組（38.14±1.17μmol/L）LDH較缺氧/復氧組減

8、少了34.35％(P＜0.05)。胡黃連苷Ⅱ200組較胡黃連苷Ⅱ200組無統(tǒng)計學顯著性差異。
　　 4、GSH活性:與對照組（64.95±3.87μmol/L）相比，缺氧組（50.27±4.10μmol/L）GSH降低了22.60％;與缺氧組相比，缺氧/復氧0.5h組（32.95±2.71μmol/L）GSH降低了34.45％;與缺氧/復氧0.5h組相比，缺氧/復氧1h組(22.96±4.04μmol/L)GSH降低了30.32

9、％（均P＜0.05），缺氧/復氧2h組較缺氧/復氧1h組無統(tǒng)計學顯著性差異。胡黃連苷Ⅱ50組(30.52±2.08μmol/L)LDH較缺氧/復氧組升高了32.93％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ100組（40.36±2.71μmol/L）LDH較缺氧/復氧組升高了76.09％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ200組(41.63±2.52μmo1/L)LDH較缺氧/復氧組升高了81.32％(P＜0.05)。胡黃連苷Ⅱ200組較胡黃連苷Ⅱ200

10、組無統(tǒng)計學顯著性差異。
　　 5、SOD活性:與對照組（106.35±5.72 U/mg pro）相比，缺氧組(80.53±3.56U/mg pro)SOD降低了24.28％;與缺氧組相比，缺氧/復氧0.5h組（59.88±2.98 U/mgpro) SOD降低了17.54％;與缺氧/復氧0.5h組相比，缺氧/復氧1h組(49.38±2.44U/mg pro) SOD降低了17.53％（均P＜0.05），缺氧/復氧2h組較缺氧/

11、復氧1h組無統(tǒng)計學顯著性差異。胡黃連苷Ⅱ50組（69.88±2.98 U/mg pro）LDH較缺氧/復氧組升高了41.51％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ100組（88.71±4.44 U/mg pro）LDH較缺氧/復氧組升高了79.64％(P＜0.05);胡黃連苷Ⅱ200組（91.00±4.13 U/mg pro）LDH較缺氧/復氧組升高了84.28％(P＜0.05)。胡黃連苷Ⅱ200組較胡黃連苷Ⅱ200組無統(tǒng)計學顯著性差異。