阿魏酸鈉預(yù)處理對成年大鼠心肌細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：在成年大鼠原代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞A/R損傷模型上，探討SF藥理性心肌缺血預(yù)適應(yīng)保護(hù)作用及其與K<'+ATP>通道的關(guān)系。 方法：實(shí)驗(yàn)用體重200-250gWistar大鼠，雌雄不拘，無菌取出大鼠心臟，經(jīng)透明質(zhì)酸酶、胰蛋白酶消化，純化制成心肌細(xì)胞，在培養(yǎng)的第ld給予模擬缺氧(缺血)液、模擬復(fù)氧(再灌注)液以及干預(yù)因素阿魏酸鈉、K<'+ATP>通道阻斷劑格列本脲(Glib)處理，隨機(jī)分為6組：①正常對照(Control)組：復(fù)氧液

2、孵育70min；②缺氧/復(fù)氧(A/R)組：缺氧40min，復(fù)氧30min；③缺氧預(yù)處理(APC)+A/R組：缺氧10min，復(fù)氧20min，再缺氧40min，復(fù)氧30min；④SF+A/R組：SF預(yù)先處理20分鐘后進(jìn)行缺氧/復(fù)氧；⑤Glib+APC+A/R組：Glib預(yù)先處理20min后，再進(jìn)行缺氧預(yù)適應(yīng)和缺氧/復(fù)氧處理；⑥Glib+SF+A/R組：Glib預(yù)先處理20min后，再進(jìn)行SF處理和缺氧/復(fù)氧處理。各組分別進(jìn)行以下指標(biāo)觀察：

3、①心肌細(xì)胞存活率(MTT法)；②培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性；③透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：①心肌細(xì)胞存活率：A/R組(41.5±1.9％)與Control組(87.8±1.3％)比較，有顯著差異(p<0.01)；APC+A/R組(74.5±3.3％)、SF+A/R組(73.5±3.0％)分別與A/R組比較，有顯著性差異(均p<0.01)；APC+A/R組和SF+A/R組之間比較無顯著性差異(p>0.05)；Glib+

4、APC+A/R組(42.9±2.8％)、Glib+SF+A/R組(42.8±1.9％)與A/R組相比，無顯著性差異(p>0.05)，但與APC+A/R組相比有顯著性差異(均p<0.01)。②LDH活性：A/R組(27.8±1.3)與Control組(3.2±1.2)比較，有顯著差異(p<0.01)；APC+A/R組(15±1.8％)、SF+A/R組(18±2％)分別與A/R組比較，有顯著性差異(均p<0.01)；APC+A/R組和SF+

5、A/R組之間比較無顯著性差異(p>0.05)；Glib+APC+A/R組(24±2.7)、Glib+SF+A/R組(22.8±2)與A/R組相比，無顯著性差異(p>0.05)，但與APC+A/R組相比有顯著性差異(均p<0.01)。③透射電鏡觀察：Control組心肌細(xì)胞肌節(jié)清楚，線粒體豐富，無明顯水腫、空泡化；A／R組心肌細(xì)胞線粒體明顯腫脹，個(gè)別線粒體呈空泡狀，嵴消失或變形，肌絲消失，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)破壞，細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)不均勻，有核邊聚現(xiàn)象