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1、該文首先采用了生化方法和電泳技術(shù)對海參消化蛋白酶的性質(zhì)進(jìn)行了初步探討.分別觀察了pH值、溫度、蛋白酶抑制劑和金屬離子對蛋白酶活性的影響.實驗結(jié)果表明,粗酶中主要含有四種蛋白酶,其最適pH分別為2.0、5.0、8.0和13.5.通過底物-SDS-PAGE觀察到三個蛋白酶分子量分別為21.6,39.1和114.1kDa.分子量為39.1kDa的蛋白酶在pH8.0有較強(qiáng)活性,可被PMSF和EDTA抑制,表現(xiàn)出膠原蛋白酶活性.分子量為20.6k
2、Da蛋白酶的最適pH為13.5,能被EDTA完全抑制,是一種金屬蛋白酶,且有較強(qiáng)的pH穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性.經(jīng)研究,不同部位的海參消化蛋白酶的活性有所差異,且隨著季節(jié)而變化.海參的超堿性消化蛋白酶(HAP)經(jīng)過兩次Q-SepharoseFF離子交換色譜和Sephacryl S-300分子篩層析提純得到了純化31.7倍的蛋白酶,經(jīng)SDS-PAGE測定其分子量為20.6kDA.對HAP進(jìn)行的生化特性研究表明,它的最適pH為13.5,最適溫度為3
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