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文檔簡介
1、目的:觀察內(nèi)毒素刺激對(duì)大鼠肺泡巨噬細(xì)胞(AM)中核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、AP-1的活性影響;探討核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、AP-1在LPS刺激大鼠肺泡巨噬細(xì)胞表達(dá)TNF-α中的調(diào)控作用.方法:(1)應(yīng)用凝膠遷移阻滯技術(shù)(Electrophoretic mobility shift assay EMSA)檢測(cè)LPS(E.coli 026:B6)刺激大鼠AM核蛋白中NF-κB、AP-1的DNA結(jié)合活性的動(dòng)態(tài)變化;(2)在LPS刺激前12小時(shí),應(yīng)用
2、轉(zhuǎn)基因技術(shù)將NF-κB和AP-1的硫代寡核苷酸圈套(S-ODN decoy)轉(zhuǎn)入大鼠AM;(3)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(Enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)觀察NF-κB和AP-1的硫代寡核苷酸圈套(S-ODN decoy)及其組合圈套對(duì)LPS刺激大鼠AM表達(dá)TNF-α的影響.結(jié)論:LPS刺激可使大鼠AM內(nèi)NF-κB、AP-1同時(shí)活化,二者在LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中可能發(fā)揮重要作用:同時(shí)抑制NF-
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