糖調(diào)節(jié)受損大鼠認知功能障礙及其NF-κB、TNF-α表達.pdf

1、目的:通過高脂高糖飼養(yǎng)法建立糖調(diào)節(jié)受損大鼠模型，研究大鼠腦組織NF-κB，TNF-α因子在認知功能障礙中作用，從炎癥角度探討糖調(diào)節(jié)受損對認知功能障礙的影響。
　　方法:將56只SPF級wistar雄性大鼠隨機分為對照組和實驗組，每組28只，對照組給予普通飼料，實驗組給予高脂高糖飼料，監(jiān)測大鼠體重變化，根據(jù)實驗組食量調(diào)整對照組食量，飼養(yǎng)20周。8W開始，以后每兩周進行1次葡萄糖耐量實驗，選取空腹、0h、0.5 h、1h、2h、3h五

2、個時點測鼠尾血糖，空腹血糖6.2～7.5mmol/l或者餐后兩小時血糖7.9～10.4mmol/l的大鼠提示造模成功。將對照組和實驗組分別于5W、10W、15W、20W進行水迷宮實驗，包括適應性訓練、定位航行訓練、空間探索試驗三部分。水迷宮試驗數(shù)據(jù)采用SPSS20.0軟件，根據(jù)重復測量的多因方差分析對數(shù)據(jù)進行分析，結果以(X)±s表示，取P=0.05，組間均數(shù)比較采用q檢驗。將對照組28只大鼠（標記為A組）和實驗組28只大鼠（標記為B組

3、）分別于5W末、10W末、15W末、20W末四個時點斷頸處死，每個時點每組處死7只，順序標記為:A1，B1，A2，B2，A3，B3，A4，B4。4％多聚甲醛固定腦組織24h后用石蠟包埋、切片，采用免疫組化法和原位雜交法檢測大鼠腦組織NF-κB、TNF-α表達情況，每張切片在顯微鏡下200*視野下選5個互不重疊視野，以平均光密度值反映表達情況。采用SPSS20.0軟件對大鼠腦組織NF-κB、TNF-α陽性表達及認知障礙進行Pearson相

4、關分析。
　　結果:大鼠體重隨著年齡增長而增加，實驗組較同齡對照組體重增加較為明顯(P＜0.05)。與對照組相比，12W前實驗組與對照組血糖無明顯差異（P＞0.05）;12W以后實驗組大鼠血糖升高(P＜0.05);隨著飼養(yǎng)周期延長，大鼠成模率逐漸增高，15W實驗組全部成模。水迷宮實驗顯示:5W實驗組學習記憶能力較對照組強(P＜0.05)，10W以后實驗組學習記憶能力開始下降，20W實驗組較對照組學習記憶能力顯著下降(P＜0.01)

5、。NF-κB、TNF-α陽性表達5W和10W實驗組與對照組差異不明顯(P＞0.05)，15W實驗組與對照組有差異(P＜0.05)，20W實驗組與對照組有顯著差異(P＜0.01)。10W以后實驗組各時間點NF-κ、TNF-α蛋白和mRNA表達水平逐漸增高，組間差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Pearson直線相關回歸分析發(fā)現(xiàn)，實驗組大鼠學習記憶成績與NF-κB陽性表達水平呈正相，與TNF-α陽性表達水平呈正相關，而對照組兩者無明顯相關性

6、。
　　結論:高脂高糖飼養(yǎng)可以建立穩(wěn)定的糖調(diào)節(jié)受損大鼠模型，此模型可以用于糖調(diào)節(jié)受損疾病狀態(tài)的研究;隨著高脂高糖飼養(yǎng)時間的延長，大鼠血糖顯著升高。研究結果提示高脂高糖、年齡增加等因素均與糖調(diào)節(jié)受損有關。隨著飼養(yǎng)周期的延長，糖調(diào)節(jié)受損模型的建立，大鼠的學習記憶能力降低。NF-κB和TNF-α陽性表達水平增高與大鼠學習記憶能力減退有相關性，即大鼠腦組織NF-κB和TNF-α的陽性表達水平增高可能參與了大鼠認知功能障礙形成的過程，大鼠腦