WT-1基因在腎胚瘤中的表達(dá)及其對G401細(xì)胞系腫瘤逆轉(zhuǎn)的研究.pdf

1、目的:該實(shí)驗(yàn)擬檢測WT-1基因在腎胚瘤各細(xì)胞中的表達(dá)情況,然后根據(jù)對WT-1和EGR-Ⅰ基因在腎胚瘤中表達(dá)情況的統(tǒng)計分析,探討其在腫瘤發(fā)生方面的作用;并且通過RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)生32P標(biāo)記的cDNA探針進(jìn)行原位雜交,從cDNA文庫中篩選含有WT-1基因的克隆,進(jìn)一步將WT-1基因連到表達(dá)載體導(dǎo)入腎胚瘤細(xì)胞系G401中表達(dá),分子水平研究G401細(xì)胞的生長、凋亡及腫瘤逆轉(zhuǎn)情況,從而為研究WT1基因的功能提供參考,為基因水平治療腎胚瘤提供重要

2、的依據(jù).結(jié)論:(1)WT-1蛋白定位于細(xì)胞核內(nèi),正常腎臟腎小球內(nèi)皮細(xì)胞核染色較深,而腎小管核染色較淺.而EGR-Ⅰ蛋白定位于細(xì)胞質(zhì),正常腎臟的近曲小管和遠(yuǎn)曲小管EGR-Ⅰ免疫組化胞質(zhì)染色均較深,而腎小球染色較淺.61例腎胚瘤樣品中有36(59%)例的胚基細(xì)胞發(fā)生WT-1免疫反應(yīng);61例腎胚瘤樣品中有56%樣品胚基發(fā)生EGR-Ⅰ免疫反應(yīng),87%樣品的上皮細(xì)胞發(fā)生免疫反應(yīng)結(jié)果表明胚基中WT-1和EGR-Ⅰ基因表達(dá)明顯相關(guān).(2)導(dǎo)入WT-1