HIF-1α和PTEN基因在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義的研究.pdf

1、目的：HIF-1是一種在哺乳動(dòng)物組織中廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子，組織處于缺氧狀態(tài)時(shí)，它發(fā)揮轉(zhuǎn)錄和基因調(diào)控作用，是缺氧狀態(tài)下血管生成的核心調(diào)控因子。HIF-1由α亞基(HIF-1 α)和β亞基(HIF-1β)組成。HIF-1β是HIF-1的結(jié)構(gòu)性亞基，在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平相對(duì)穩(wěn)定；HIF-1 α是HIF-1的功能亞基，正常生理?xiàng)l件下一般檢測(cè)不到，在特定誘導(dǎo)條件下，細(xì)胞內(nèi)HIF-1 α水平增高并發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。在腫瘤的發(fā)生和生長(zhǎng)過(guò)程中，癌基因或抑癌基

2、因改變會(huì)通過(guò)不同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑激活HIF-1基因。目前普遍認(rèn)為腎癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多基因、多階段的過(guò)程，其發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，研究表明許多癌基因的激活及抑癌基因的失活參與了這一過(guò)程。PTEN作為抑癌基因是目前研究的熱點(diǎn)。PTEN是新近發(fā)現(xiàn)的具有磷酸酶活性的腫瘤抑制基因，有參與胚胎正常發(fā)育，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞遷移，鋪展和局部粘附功能。最近有文獻(xiàn)報(bào)道抑癌基因PTEN可調(diào)控HIF-1 α的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。因此我們應(yīng)用免疫組化的方法初步探討抑癌基

3、因PTEN與HIF-1 α在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及相互關(guān)系，為腎癌的診斷及臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：用免疫組化S-P法檢測(cè)40例腎細(xì)胞癌、20例癌旁腎組織，5例非瘤正常。腎組織中PTEN及HIF-1α的表達(dá)。40例腎癌中，其中男性27例，女性13例；年齡23～74歲，平均53.3歲；臨床分期(Robson法)：Ⅰ期Ⅱ例，Ⅱ期14例，Ⅲ期l O例，Ⅳ期5例；組織學(xué)分級(jí)(Fuhrman法)：Ⅰ級(jí)15例，Ⅱ級(jí)l 8例，Ⅲ級(jí)7例；淋巴

4、結(jié)轉(zhuǎn)移腎癌患者10例；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移腎癌患者5例。將表達(dá)結(jié)果與組織學(xué)類型、組織學(xué)分級(jí)、淋巴轉(zhuǎn)移和臨床分期等生物學(xué)行為進(jìn)行相關(guān)分析。 結(jié)果： 1 PTEN主要表達(dá)在細(xì)胞漿中，正常腎組織細(xì)胞中PTEN蛋白表達(dá)全部為陽(yáng)性，腎癌癌旁非癌腎組織PTEN蛋白陽(yáng)性高表達(dá)率為95％，腎癌組織中陽(yáng)性高表達(dá)率為65.0％，差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；根據(jù)臨床分期PTEN陽(yáng)性高表達(dá)情況為：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期分別為90.9％、85.

5、7％、30.0％和20.0％，差異有顯著性意義(P<0.01)，其中工期與Ⅲ期、Ⅲ期與Ⅳ期、Ⅱ期與Ⅲ期、Ⅱ期與Ⅳ期之間陽(yáng)性率有顯著性差異(P<0.05)，Ⅰ期+Ⅱ期合并后明顯高于Ⅲ期+Ⅳ期，陽(yáng)性高表達(dá)率有顯著性差異(P<0.01)；PTEN在透明細(xì)胞癌，顆粒細(xì)胞癌及混合細(xì)胞癌陽(yáng)性高表達(dá)率分別為62.9％、66.7％和71.4％，三者之間差異無(wú)顯著性(P<0.05)；PTEN在腎癌組織中的蛋白表達(dá)與患者的性別、年齡和腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性(

6、P<0.05)；組織學(xué)分級(jí)Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)腎癌患者PTEN蛋白陽(yáng)性高表達(dá)率分別為86.7％、61.1％和28.6％，差異有顯著性意義(P<0.05)，其中Ⅰ級(jí)與Ⅱ級(jí)之間，Ⅱ級(jí)與Ⅲ級(jí)之間陽(yáng)性率無(wú)顯著性差異(P>0.05)，Ⅰ級(jí)與Ⅲ級(jí)之間差異有顯著性意義(P<0.05)；在有、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中PTEN蛋白的陽(yáng)性高表達(dá)率分別為30.O％和76.7％(P<0.05)；無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移腎癌患者PTEN蛋白表達(dá)率71.4％，明顯高于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移腎癌患者20

7、.0％，差異有顯著性意義(P<0.05)。 2 HIF-1α主要在細(xì)胞核表達(dá)，也有少量表達(dá)在細(xì)胞漿。正常腎組織中HIF-1α表達(dá)全部為陰性，癌旁非癌腎組織HIF-1α高表達(dá)率為0％，明顯低于腎癌組織中陽(yáng)性高表達(dá)率57.5％，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HIF-1α在腎癌組織中的蛋白表達(dá)與患者的性別、年齡及腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)；HIF-1α在透明細(xì)胞癌、顆粒細(xì)胞癌及混合細(xì)胞癌陽(yáng)性高表達(dá)率分別為74.1

8、％、16.7％和28.6％，三者之間差異有顯著性(P<0.05)；透明細(xì)胞癌組與顆粒細(xì)胞癌組之間，透明細(xì)胞癌組與混合細(xì)胞癌組之間差異有顯著性(P<0.05)，顆粒細(xì)胞癌組與混合細(xì)胞癌組之間差異無(wú)顯著性(P>0.05)。根據(jù)臨床分期HIF-1α陽(yáng)性高表達(dá)情況為：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期分別為22.3％、50.0％、90.0％和100.0％，差異有顯著性意義(P<0.01)，其中Ⅰ期與Ⅲ期，工期與Ⅳ期之間陽(yáng)性率均有顯著性差異(P<0.01)，

9、Ⅰ期+Ⅱ期與Ⅲ期+Ⅳ期之間陽(yáng)性率有顯著性差異(P<0.01)；組織學(xué)分級(jí)Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)和Ⅲ級(jí)腎癌患者HIF-1α蛋白陽(yáng)性高表達(dá)率分別為26.7％、72.5％和85.8％，差異有顯著性意義(P0.05)；在有、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中HIF一1 α的陽(yáng)性高表達(dá)率分別為90.0％和46.7％，差異有顯著性意義(P<0.05)；無(wú)遠(yuǎn)處

10、轉(zhuǎn)移腎癌患者HIF-1α陽(yáng)性高表達(dá)率51.4％，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移腎癌患者100.0％，差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 3 40例腎癌組織中，PTEN蛋白表達(dá)與腎癌Robson分期及組織學(xué)分級(jí)呈負(fù)相關(guān)的關(guān)系，HIF-1α蛋白表達(dá)與腎癌Robson分期及組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)的關(guān)系，隨臨床Robson分期的增加，PTEN蛋白表達(dá)率隨之降低(P<0.01)，HIF-1 α蛋白表達(dá)率隨之升高(P<0.01)。同樣，隨組織學(xué)分級(jí)的升高，PTE

11、N蛋白表達(dá)率隨之降低(P<0.05)，HIF-1 α蛋白表達(dá)率隨之升高P

12、無(wú)關(guān)，與腎癌的組織學(xué)分級(jí)、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為判斷腫瘤浸潤(rùn)進(jìn)展的指標(biāo)。 2 HIF-1 α蛋白在正常腎組織中均呈陰性表達(dá)，在腎癌組織中表達(dá)升高。HIF-1 α蛋白表達(dá)與腎癌的組織學(xué)分級(jí)、病理類型、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示它可能與腎細(xì)胞癌的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，同樣也可作為判斷腫瘤浸潤(rùn)進(jìn)展的指標(biāo)。 3 PTEN可能通過(guò)PI(3)k/Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路調(diào)節(jié)HIF-1 α蛋白的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄活性。PI(3)