家兔燒傷早期痂下水腫液中白蛋白的吸收現(xiàn)象及藥代動力學觀察.pdf

1、正常機體受到熱力損傷后血管通透性增高，導致燒傷早期體液滲入第三間隙并潴留在其中，引起第三間隙異常。這部分體液中白蛋白含量較大，是造成血漿蛋白濃度下降，導致血漿膠體滲透壓（colloid osmotic pressure，COP）急劇下降和組織液COP升高的重要因素之一，同時也加強了燒傷后水腫的形成，且進一步引發(fā)燒傷后機體的各種生理病理變化。
　　 痂下水腫液（subeschar tissue fluid，STF）的聚集是燒傷局部

2、第三間隙異常的典型表現(xiàn)之一，其間蛋白含量與血清含量相近，約為血漿蛋白量的80％，以白蛋白為主。那么，滲入痂下水腫液中的白蛋白是否一定處于靜止不動的滯留狀態(tài)？或否如同小分子物質那樣能夠滲出與吸收同時共存？若存在回吸收，那么回吸收的速度與量怎樣？以及回吸收后的白蛋白是否依然可以發(fā)揮相應生理功能？這些問題需要通過實驗的方法來回答。
　　 本研究為了揭示燒傷后痂下水腫液白蛋白的動態(tài)變化規(guī)律，通過建立家兔局部皮膚深度燒傷模型并在其痂下組織

3、注射“示蹤”用人白蛋白，以便模擬傷后痂下水腫液白蛋白的滲出，連續(xù)檢測兔血液中示蹤白蛋白的濃度，觀察傷后早期示蹤白蛋白含量動態(tài)變化，同時分析其藥代動力學變化，從而部分揭示其分布規(guī)律，為今后臨床上我們趨利避害，探討減少蛋白外滲或促進其重吸收的方法打下理論基礎。因此，研究白蛋白等大分子在燒傷痂下水腫液中的分布規(guī)律對于燒傷病人的臨床救治具有重要的參考作用。研究目的研究通過建立家兔局部皮膚深度燒傷模型并在其痂下注射人白蛋白作為示蹤，檢測血液中示蹤

4、白蛋白濃度，以觀察燒傷早期白蛋白動態(tài)，同時分析標本中示蹤白蛋白的藥代動力學變化，從而推測燒傷后痂下水腫液等第三間隙中大分子物質的轉運及分布規(guī)律。
　　 實驗方法：
　　 1、家兔8％ TBSA Ⅲ度燒傷早期痂下水腫液中白蛋白的吸收現(xiàn)象及藥代動力學觀察34只成年雄性新西蘭兔，體質量（2.8±0.3）kg，按隨機數(shù)字表法將家兔分成實驗組和對照組，每組17只。家兔飼養(yǎng)1周，背部備皮（先剪毛，后使用硫化鈉脫毛），按45mg/kg

5、由家兔耳靜脈緩慢注入10％戊巴比妥鈉溶液麻醉后，實驗組使用電燙傷儀100℃燙傷家兔背部15s，制成約8％TBSA Ⅲ度燙傷（經(jīng)病理切片證實）模型。隨即在痂下注射人白蛋白溶液5ml（含1g人白蛋白）作為示蹤。家兔自由飲水。于傷后2、4、8、16、24、48、72h分別在家兔后肢脛靜脈剪毛抽取血液標本1.5ml；對照組家兔除不予燙傷外，其余處理措施同實驗組。標本靜置2h后，2100r/min離心15min取上清液，采用雙抗體夾心法（一抗為兔

6、抗人白蛋白血清抗體、二抗為羊抗兔IgG抗體）檢測示蹤白蛋白濃度，另使用生化分析儀（意大利LOGOTECH公司）檢測家兔血清白蛋白。使用3P97實用藥代動力學計算程序處理藥物濃度數(shù)據(jù)，擬合藥代動力學模型并計算其相關藥代動力學參數(shù)，采用SPSS13.0進行統(tǒng)計學處理。
　　 2、家兔40％ TBSA Ⅲ度燒傷早期痂下水腫液中白蛋白的吸收現(xiàn)象及藥代動力學觀察40只成年雄性新西蘭兔，體質量（2.8±0.3）kg，按隨機數(shù)字表法將家兔分成

7、實驗組和對照組，每組20只。家兔飼養(yǎng)1周，背部備皮（先剪毛，后使用硫化鈉脫毛），按45mg/kg由家兔耳靜脈緩慢注入10％戊巴比妥鈉溶液麻醉后，使用電燙傷儀100℃燙傷家兔背部15s，制成約40％ TBSA Ⅲ度燙傷（經(jīng)病理切片證實）模型。隨即在痂下注射人白蛋白溶液5ml（含1g人白蛋白）作為示蹤。家兔自由飲水。于傷后2、4、8、16、24、48、72、96、128h分別在家兔后肢脛靜脈剪毛抽取血液標本1.5ml；對照組家兔除不予燙傷外

8、，其余處理措施同實驗組。標本靜置2h后，2100r/min離心15min取上清液，采用雙抗體夾心法（一抗為兔抗人白蛋白血清抗體、二抗為羊抗兔IgG抗體）檢測示蹤白蛋白濃度，使用生化分析儀（意大利LOGOTECH公司）檢測家兔血清白蛋白。使用3P97實用藥代動力學計算程序處理藥物濃度數(shù)據(jù),擬合藥代動力學模型并計算其相關藥代動力學參數(shù)，采用SPSS13.0進行統(tǒng)計學處理。
　　 實驗結果：
　　 1、對照組注射示蹤白蛋白后，

9、出現(xiàn)一個較小的吸收峰，以8-48小時為明顯，16h該白蛋白濃度達峰值，但示蹤白蛋白總的吸收量（用曲線下面積表示）與兔白蛋白含量比值約為10-3。
　　 2、家兔被制成8％ TBSA Ⅲ度燙傷后，實驗組家兔傷后8h示蹤白蛋白濃度為(421±10)μg/L，達峰值；藥代動力學分析結果顯示以二房室模型為最佳（權重W＝1/C2）。實驗組示蹤白蛋白分布相半衰期（t1/2α）為4.0271h，明顯短于對照組t1/2α（12.0907h）；實

10、驗組AUC為22336.38μg·h/ml，明顯大于對照組（5827.77μg·h/ml）。
　　 3、家兔被制成40％ TBSA Ⅲ度燙傷后，實驗組家兔傷后24h示蹤白蛋白濃度為(423±27) μg/L，達峰值；藥代動力學分析結果顯示以二房室模型為最佳（權重W＝1/C2）。實驗組示蹤白蛋白分布相半衰期（t1/2α）為1.7326h，明顯短于對照組t1/2α（8.8182h），同時也明顯短于8％ TBSA Ⅲ度燙傷組t1/2α

11、（4.0271h）；實驗組AUC為88814.84μg·h/ml，明顯大于對照組（13738.47μg·h/ml），同時也明顯大于8％ TBSA Ⅲ度燙傷組（22336.38μg·h/ml）。
　　 結論：
　　 研究結果表明：
　　 一、大分子物質如白蛋白在正常情況下亦存在皮下組織的吸收現(xiàn)象，但其吸收速度和吸收的數(shù)量均較小，吸收的白蛋白量遠遠不足以影響血漿白蛋白含量（兩者相差103倍）。
　　 二、在家