葡萄球菌臨床感染及對莫匹羅星耐藥機制研究.pdf

1、目的：
　　 1．了解溫州醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院2005年1月～2007年12月葡萄球菌(金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌)的臨床分布及耐藥變遷情況，掌握其流行病學資料，為臨床抗葡萄球菌藥物選擇提供依據(jù)。
　　 2．調(diào)查本院葡萄球菌臨床分離株對莫匹羅星的耐藥現(xiàn)狀，研究莫匹羅星高水平的耐藥機制，并分析莫匹羅星耐藥菌株對臨床常用抗菌藥物的敏感性，為合理使用莫匹羅星及控制莫匹羅星耐藥葡萄球菌的感染及擴散提供理論。

2、　　 方法：
　　 1．回顧性調(diào)查2005年1月～2007年12月間臨床分離的葡萄球菌(724株金黃色葡萄球菌，358株表皮葡萄球菌和197株溶血葡萄球菌)的臨床分布情況，并統(tǒng)計三年間三種葡萄球菌對氨芐西林/舒巴坦(SAM)、克林霉素(CLI)、紅霉素(ERY)、頭孢唑啉(CFZ)、苯唑西林(OXA)、青霉素(PEN)、利福平(RIF)、四環(huán)素(TET)、復方新諾明(SXT)、萬古霉素(VAN)、左旋氧氟沙星(LEV)和慶大霉

3、素(GEN)12種抗菌藥物的耐藥性及β-內(nèi)酰胺酶陽性率的變遷，分析比較三種葡萄球菌的甲氧西林耐藥菌株和甲氧西林敏感菌株對上述抗菌藥物的耐藥率。
　　 2．對2005年1月-2007年5月間本實驗室保存并存活的490株金黃色葡萄球菌、301株表皮葡萄球菌和130株溶血葡萄球菌采用頭孢西丁紙片擴散法和mecA基因檢測證實甲氧西林耐藥菌株；用紙片擴散法篩選莫匹羅星耐藥葡萄球菌，并用微量肉湯法檢測莫匹羅星耐藥菌株的最小抑菌濃度(MIC)

4、，確定其耐藥水平。統(tǒng)計分析莫匹羅星藥菌株對慶大霉素、左氧氟沙星、復方新諾明、利福平、紅霉素、克林霉素、四環(huán)素和萬古霉素藥物敏感性。
　　 3．通過高水平耐藥基因mupA基因的擴增及對擴增產(chǎn)物進行測序、比對，探討莫匹羅星高水平耐藥機制。
　　 結(jié)果：
　　 1．2005年～2007年在臨床各類標本中共檢出724株金黃色葡萄球菌，358株表皮葡萄球菌和197株溶血葡萄球菌。三種葡萄球菌主要來自痰液標本，占所有標本39

5、．7％～62．2％。膿液、留置導管、尿液和血液標本也占了一定的比例。從科室分布來看，三種葡萄球菌主要集中于神經(jīng)內(nèi)外科和ICU。2005年～2007年間MRS的檢出率為80．1％(1024/1279)。MRSA的分離率有增長趨勢，由2005年的63．8％上升到2007年的74．5％。雖然MRSE的分離率有所下降，但一直在86．3％以上，MRSH的比例基本穩(wěn)定在95．0％左右。
　　 2．三種葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺酶陽性率均在95．0

6、％以上。未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥菌株。金黃色葡萄球菌對氨芐西林/舒巴坦、克林霉素、紅霉素、頭孢唑啉、苯唑西林、青霉素、四環(huán)素、左旋氧氟沙星和慶大霉素耐藥率高>57．0％，且三年的高耐藥率基本保持不變，對復方新諾明耐藥率較低(25．6％)；表皮葡萄球菌對β-內(nèi)酰胺類藥物(氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑啉、苯唑西林和青霉素)具有高耐藥性，耐藥率>90．0％，利福平與左旋氧氟沙星較敏感，耐藥率分別為19．6％和21．2％。三年間大部分藥物的耐藥性基本穩(wěn)定

7、，除克林霉素的耐藥率由2005年的50．5％逐漸下降到2007年的29．8％。溶血葡萄球菌對利福平與四環(huán)素較為敏感外，對其它9種抗菌藥物的耐藥率均在63．5％以上。
　　 3．11種抗菌藥物中，僅萬古霉素未發(fā)現(xiàn)耐藥株。MRSA對除復方新諾明外的9種抗菌藥物的耐藥率>63．5％，顯著高于MSSA(P<0．01)，MRSA和MSSA對復方新諾明耐藥率無統(tǒng)計學差異(P>0．05)，耐藥率分別為23．9％和29．4％。MRSE對10種抗

8、菌藥物的耐藥率均不同程度高于MSSE(P<0．01)，對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物(氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑琳和青霉素)均達100．0％。對利福平和左旋氧氟沙星最低，為21．5％和23．4％。MRSH對氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑琳和紅霉素的耐藥率高于MSSH(P<0．01)，對其余7種抗菌藥物的耐藥率兩者無差異(P>0．05)。10種抗菌藥物中，MRSH對利福平和四環(huán)素的耐藥率較為敏感，分別為10．1％和26．5％。對其余抗菌藥物的耐藥率介于6

9、4．6％～100．0％之間。
　　 4．921株葡萄球菌中共篩選出莫匹羅星耐藥株91株，耐藥率為9．9％，其中金黃色葡萄球菌對莫匹羅星耐藥率為5．5％(27/490)，表皮葡萄球菌耐藥率為10．3％(31/301)，溶血葡萄球菌耐藥率為25．4％(33/130)。表皮葡萄球菌與金黃色葡萄球菌都以2006年為最低，而溶血葡萄球菌則相反，以2006年為最高。91株莫匹羅耐藥菌中檢出82株高水平(MuH)耐藥菌株(金黃色葡萄球菌22株

10、，表皮葡萄球菌27株，溶血葡萄球菌33株)，占90．1％，而低水平(MuL)耐藥9株(金黃色葡萄球菌5株，表皮葡萄球菌4株)，占9．9％。耐藥菌株主要來源于痰液標本，莫匹羅星耐藥金黃色葡萄球菌集中于燒傷科，而表皮葡萄球菌與溶血葡萄球菌以ICU為主。在82株莫匹羅星MuH耐藥菌株中均檢有mupA基因，而在9株MuL耐藥菌株中未檢到該基因。頭孢西丁與mecA基因檢測結(jié)果一致：91株莫匹羅星耐藥葡萄球菌中，MRS有68株，占74．7％。在82

11、MuH菌株中，MRS占76．8％(63/82)，而在MuL菌株中，MRS占55．6％(5/9)。MRS在MuH菌株和MuL菌株的分布無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。
　　 5．莫匹羅星耐藥菌僅對萬古霉素的耐藥率為0．0％。27株莫匹羅星耐藥金黃色葡萄球菌對頭孢西丁、慶大霉素、左氧氟沙星、復方新諾明、利福平、紅霉素、克林霉素和四環(huán)素8種抗菌藥物均具有高耐藥率(>66．7％)，多重耐藥株達88．9％，并有12株對除萬古霉素外的8種抗菌

12、藥物全部耐藥，且MuH和MuL對9種抗菌藥物的耐藥率均無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。表皮葡萄球菌對利福平敏感，耐藥率為9．7％，對其余抗菌藥耐藥率介于35．5％～74．2％，多重耐藥株達61．3％(19/27)。除復方新諾明對MuH耐藥率高與MuL(P<0．05)外，其余7種抗菌藥物兩者無統(tǒng)計差異(P>0．05)。溶血葡萄球菌對利福平和四環(huán)素都較為敏感，耐藥率為15．2和21．2％。對其余6種抗菌藥物均表現(xiàn)為高耐藥率，多重耐藥株達100

13、％(33/33)。
　　 結(jié)論
　　 1．臨床分離的葡萄球菌標本分布以痰液為主，并主要集中于以神經(jīng)內(nèi)外科和ICU為主。MRS的檢出率高。
　　 2．葡萄球菌β-內(nèi)酰胺酶陽性率高。對大部分的抗菌藥物耐藥情況嚴重。MRS對絕大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率不同程度高于MSS。未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥菌株。
　　 3．莫匹羅星耐藥葡萄球菌己在我院臨床分離株中出現(xiàn)，檢出率為9．9％。莫匹羅星耐藥菌在CNS更為流行。耐藥菌株中，以