腸球菌臨床感染特點(diǎn)及耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 1．了解溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院2007年1月～2009年12月臨床分離腸球菌的分布特點(diǎn)及耐藥特性，為臨床治療提供參考。
　　 2．研究臨床標(biāo)本中分離的糞腸球菌中ermB基因與轉(zhuǎn)座子Tn1545和Tn917的攜帶情況極其與抗菌藥物耐藥性的相互關(guān)系。
　　 3．研究萬古霉素耐藥腸球菌(VRE)的耐藥表型和基因特性。
　　 方法：
　　 1．統(tǒng)計(jì)分析溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院2007年1月至2

2、009年12月分離到的2304株腸球菌的耐藥情況。
　　 2．采用K-B瓊脂擴(kuò)散法對(duì)臨床分離的糞腸球菌進(jìn)行抗菌藥物敏感性試驗(yàn)，用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)糞腸球菌ermB、Tn1545和Tn917基因，并對(duì)PCR陽(yáng)性的基因進(jìn)行測(cè)序，分析耐藥基因與耐藥性的關(guān)系。
　　 3．采用濃度梯度法(E-test)測(cè)定VRE對(duì)萬古霉素(VA)、替考拉寧(TP)的耐藥表型；PCR檢測(cè)vanA、vanB、vanC1、vanC2、vanC3

3、，并對(duì)van基因產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序。
　　 結(jié)果：
　　 1．腸球菌的臨床分布：2304株腸球菌中，以尿液標(biāo)本所占的比例最高，占37．3％(860/2304)；其他依次是腸道菌群失調(diào)患者的糞便標(biāo)本，占18．8％(434/2304)；痰液標(biāo)本，占17．0％(391/2304)；膽汁標(biāo)本，占10．4％(240/2304)；膿液標(biāo)本，占7．7％(177/2304)；其他來源的標(biāo)本占8．8％(202/2304)。菌種分布以糞腸球菌為主

4、，占33．6％(774/2304)；其次為屎腸球菌，占30．8％(709/2304)；鶉雞腸球菌和鉛黃腸球菌分別占15．2％(351/2304)和20．4％(470/2304)。不同菌種在不同來源標(biāo)本中的分布比例存在差異，糞腸球菌和屎腸球菌主要來自于尿液標(biāo)本，而鶉雞腸球菌和鉛黃腸球菌主要來自于菌群失調(diào)患者的糞便標(biāo)本。
　　 2．藥物耐藥率的結(jié)果：腸球菌對(duì)大部分臨床常用抗菌藥物表現(xiàn)為高度耐藥，并且屎腸球菌、鶉雞腸球菌、鉛黃腸球菌的

5、耐藥譜與糞腸球菌的耐藥譜存在明顯差異：糞腸球菌對(duì)喹諾酮類抗菌藥物(莫西沙星、左氧氟沙星)和β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物(青霉素、氨芐西林)的耐藥率明顯低于其它三種腸球菌，而對(duì)奎奴普丁/達(dá)福普汀和四環(huán)素的耐藥率明顯高于其它三種腸球菌(P<0．05)。并且分離到耐萬古霉素的腸球菌(VRE)96株，占4．2％(96/2304)。
　　 3．用于ermB基因、轉(zhuǎn)座子基因極其與耐藥性關(guān)系研究的86株糞腸球菌中，紅霉素的耐藥率為74．4％(64/8

6、6)；紅霉素耐藥的糞腸球菌中，ermB基因的攜帶率為95．3％(61/64)，Tn1545的攜帶率為81．3％(52/64)，Tn917的攜帶率為26．6％(17/64)。其中，26．2％(17/65)的ermB基因同時(shí)存在于Tn1545和Tn917中，55．4％(36/65)的ermB基因單純存在于Tn1545中，1．5％(1/65)的ermB基因單純存在于Tn917中。
　　 4．ermB陽(yáng)性組糞腸球菌對(duì)紅霉素、四環(huán)素、高濃

7、度慶大霉素以及左旋氧氟沙星的耐藥率均高于ermB陰性組糞腸球菌，Tn1545陽(yáng)性組糞腸球菌對(duì)紅霉素、四環(huán)素、高濃度慶大霉素以及左旋氧氟沙星的耐藥率均高于Tn1545陰性組糞腸球菌，Tn917陽(yáng)性組糞腸球菌對(duì)紅霉素和左旋氧氟沙星的耐藥率高于Tn917陰性組糞腸球菌。
　　 5．萬古霉素耐藥基因檢測(cè)結(jié)果：VRE經(jīng)PCR擴(kuò)增，均獲得vanA基因陽(yáng)性片段。未檢測(cè)到vanB、vanC1，及vanC2/3基因。
　　 結(jié)論：

8、　　 1．臨床上腸球菌感染中仍以糞腸球菌為主，但占腸球菌的比例有所下降；屎腸球菌的檢出率已接近糞腸球菌。腸球菌可引起臨床各類感染，呈多重耐藥趨勢(shì)。
　　 2．糞腸球菌耐大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的主要耐藥基因?yàn)閑rmB基因，ermB基因主要是通過Tn1545來攜帶其對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥性，并且Tn1545可能是引起糞腸球菌多重耐藥的重要機(jī)制之一。
　　 3．萬古霉素耐藥腸球菌的耐藥表型與耐藥基因型一致，菌株之間有較高的同