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文檔簡介
1、目的:依據(jù)中醫(yī)辨證施治理論,以激光誘導(dǎo)棕色挪威(brown Norway,BN)大鼠脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovasoularization,CNV)為模型,觀察健脾化濁法中藥對CNV的組織病理學(xué)影響。探討健脾化濁法中藥對CNV的作用,也為今后探求中藥治療老年性黃斑變性、高度近視黃斑出血及中心性滲出性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變等CNV類疾病提供依據(jù),以期進(jìn)一步發(fā)揮中醫(yī)藥在眼科學(xué)中的作用。
方法:1.動物模型及分組。<
2、br> 成年BN大鼠18只36眼,體重200g±20g。健脾組6只12眼,三七組6只12眼,空白對照組6只12眼。各組大鼠雙眼均造模。
采用非常成熟的氪激光誘導(dǎo)大鼠脈絡(luò)膜新生血管模型,實驗前15min大鼠腹膜內(nèi)注射5%水合氯醛溶液7.0ml/kg,雙眼復(fù)方托品酰胺散瞳。檢查雙眼前節(jié)及眼底均正常。雙眼結(jié)膜囊內(nèi)滴0.2%卡波姆滴眼液適量后,眼前放置-53D的接觸鏡,用氪激光(647nm)光凝視網(wǎng)膜均勻分布10個激光點,距
3、離視乳頭1~2PD。輸出功率360mw,光斑直徑50μm,曝光時間0.05s。
2.給藥方法。
光凝后三天開始給藥,連續(xù)給藥30天,健脾組每日灌服健脾化濁法中藥顆粒劑15.83g生藥/kg鼠重。三七組每日灌服三七粉顆粒劑(0.8g生藥/kg鼠重)水溶液,空白對照組每日灌服等體積的蒸餾水。
3.標(biāo)本制作及觀察。
10%水合氯醛溶液過量麻醉處死動物,立即摘除眼球,置10%酸性福爾馬林溶
4、液中固定24小時,經(jīng)70%、80%、90%梯度乙醇脫水后取材,再經(jīng)95%乙醇、無水乙醇脫水,二甲苯透明,浸蠟,石蠟包埋后連續(xù)切片,厚度5μm。HE染色,光鏡下觀察其組織病理學(xué)改變,并拍照記錄。并對CNV發(fā)生的面積和最大厚度進(jìn)行測量比較。統(tǒng)計數(shù)據(jù)采用SPSS11.5軟件分析
結(jié)果:動物實驗證明健脾化濁法中藥能夠抑制脈絡(luò)膜新生血管的生長,與空白對照組相比較,減少CNV厚度無明顯差異,而在減少CNV面積有顯著差異(p<0.01)
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