觀察健脾化瘀法中藥對于肝癌細(xì)胞SMMC7721增殖抑制以及侵襲遷移的影響.pdf

1、目的:
　　觀察健脾化瘀法中藥對人類肝癌細(xì)胞株SMMC-7721增殖、侵襲遷移能力的影響。
　　方法:
　　根據(jù)血清藥理學(xué)研究原理，用經(jīng)健脾化瘀法中藥水煎劑灌胃的Wistar大鼠的含藥血清以及未經(jīng)中藥灌胃的正?？瞻籽?，對人類肝癌細(xì)胞株SMMC-7721進(jìn)行體外培養(yǎng)，進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中對照組給予含有10％正常血清細(xì)胞培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)組給予含有10％、20％含藥血清細(xì)胞培養(yǎng)基。
　?、偻ㄟ^CCK-8法比色實(shí)驗(yàn)分別對培

2、養(yǎng)48h、72h后的對照組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞進(jìn)行檢測，計(jì)算其吸光度OD值以及細(xì)胞增殖抑制率，三組間均數(shù)分析使用單因素方差分析，兩兩組間分析運(yùn)用LSD分析，兩組相關(guān)數(shù)據(jù)間比較使用配對樣本t檢驗(yàn)方法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;觀察健脾化瘀法中藥對肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖抑制作用。
　?、谕ㄟ^細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)測量并計(jì)算24h、48h后的對照組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的細(xì)胞遷移速率、遷移抑制率，三組間均數(shù)分析使用單因素方差分析，兩兩組間分析運(yùn)用L

3、SD分析，兩組相關(guān)數(shù)據(jù)間比較使用配對樣本t檢驗(yàn)方法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;觀察健脾化瘀法中藥對肝癌細(xì)胞SMMC-7721遷移能力的抑制作用。
　?、弁ㄟ^Transwell侵襲性實(shí)驗(yàn)觀察并計(jì)算24h、48h后的對照組和實(shí)驗(yàn)組發(fā)生侵襲的細(xì)胞個(gè)數(shù)和侵襲抑制率，三組間均數(shù)分析使用單因素方差分析，兩兩組間分析運(yùn)用LSD分析，兩組相關(guān)數(shù)據(jù)間比較使用配對樣本t檢驗(yàn)方法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;觀察健脾化瘀法中藥對肝癌細(xì)胞SMM

4、C-7721侵襲能力的抑制作用。
　　結(jié)果:
　　①CCK-8法結(jié)果:健脾化瘀法中藥對SMMC-7721的增殖具有抑制作用，在給藥后48h，20％含藥組與10％正常組比較OD值明顯降低（P＜0.05）;在給藥后72h，10％、20％含藥血清組OD值較10％正常血清組均明顯降低(P＜0.05);在給藥后48h、72h后，20％含藥血清組的增殖抑制率均明顯高于10％含藥血清組(P＜0.05);比較20％含藥血清在給藥72h后的抑

5、制率較48h時(shí)明顯增高。
　　②細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn):在給藥后24h、48h，10％含藥、20％含藥與10％正常比較愈合速率均明顯降低(P＜0.05);20％含藥濃度下，24h與48h的遷移速率明顯降低(P＜0.05);在給藥48h后，20％含藥血清對遷移的抑制率較10％含藥血清明顯增高(P＜0.05)。
　?、墼赥ranswell侵襲性實(shí)驗(yàn):在給藥48h后20％、10％含藥血清組與10％正常血清組比較，發(fā)生侵襲的細(xì)胞數(shù)均明顯減少(