VEGF、Ang-1-Ang-2及涼血化瘀中藥誘導(dǎo)脈絡(luò)膜新生血管成熟的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)探討VEGF、Ang-1/Ang-2及活血化瘀中藥誘導(dǎo)CNV分化成熟的作用機(jī)制。
　　方法:在體外培養(yǎng)的RUVECs內(nèi)加入VEGF、Ang-1及Ang-2因子后,通過倒置相差顯微鏡和MTT比色法觀察細(xì)胞形態(tài)和增殖能力的變化,通過掃描電鏡和透射電鏡分別觀察細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)及細(xì)胞間連接的改變,探討VEGF、Ang-1/Ang-2誘導(dǎo)CNV分化成熟的作用機(jī)制:體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過激光光凝建立大鼠CNV模型,分別采用玻璃

2、體腔注射Ang-1和涼血化瘀中藥灌胃的方法來觀察對(duì)大鼠CNV的影響,研究它們對(duì)CNV的作用效果及機(jī)制。
　　結(jié)果:倒置相差顯微鏡下見:VEGF、VEGF+Ang-1、VEGF+Ang-2、VEGF+Ang-1+Ang-2組均能促進(jìn)細(xì)胞增殖,與空白對(duì)照組在形態(tài)學(xué)上無明顯差別。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:單純加入VEGF在一定范圍內(nèi)能促進(jìn)細(xì)胞增殖(濃度＜50ng/ml);但單獨(dú)的Ang-1或Ang-2卻不具備促增殖能力,即使是高濃度的(＞10

3、0ng/ml);當(dāng)VEGF聯(lián)合Ang-1或Ang-2,都能起到有效促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用。透射電鏡和掃描電鏡見:單獨(dú)的VEGF作用使細(xì)胞表面微絨毛增多,細(xì)胞器如線粒體、高爾基復(fù)合體等增大、增多,細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛;細(xì)胞間連接相對(duì)較少。聯(lián)合Ang-1見細(xì)胞器相對(duì)減少,表面微絨毛較多,細(xì)胞間連接相對(duì)單獨(dú)VEGF多。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)通過半導(dǎo)體激光很好地建立了大鼠CNV模型,玻璃體腔注射Ang-1與涼血化瘀中藥灌胃均能減少大鼠CNV的滲漏,兩者作用效