涼血化瘀方治療中心性滲出性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變臨床觀察及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)臨床病例，觀察中藥涼血化瘀方治療中心性滲出性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變(centralexudative chorioretinophy，CEC)的療效。進(jìn)一步通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察涼血化瘀中藥對(duì)脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)的影響，并初步探討其作用機(jī)理，為中藥涼血化瘀方用于臨床治療CEC提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 一、臨床病例觀察：
　　 對(duì)7

2、0例70眼確診的中心性滲出性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變患者服涼血化瘀方中藥治療，將70眼分為中藥組46眼，聯(lián)合組15眼，陳舊組9眼。服中藥3個(gè)月，總觀察時(shí)間9個(gè)月。觀察比較治療前后最佳矯正視力(best corrected vision acuity，BCVA)、熒光眼底血管造影(fundus fluorescein angiography，F(xiàn)FA)和光學(xué)相干斷層掃描(Optic coherenttomography，OCT)圖像。
　　

3、 二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究：
　　 1.建立CNV動(dòng)物模型，并評(píng)價(jià)可行性。
　　 棕色挪威(brown Norway，BN)大鼠32只一眼行氪激光(659nm)眼底光凝，另一眼作空白對(duì)照。激光功率、光凝斑直徑和曝光時(shí)間分別為360mW、501μm及0.05s。光凝20點(diǎn)。分別在光凝后7，14，21，28d隨機(jī)選取7只大鼠行眼底照像、FFA檢查。隨機(jī)選取1只大鼠行脈絡(luò)膜血管鋪片檢查。眼球標(biāo)本行組織病理切片光鏡、Ⅷ免疫組織化學(xué)染色觀

4、察。
　　 2.評(píng)價(jià)不同濃度涼血化瘀中藥對(duì)氪激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV形態(tài)的影響，從中篩選最佳濃度。
　　 659nm激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV模型同1，隨機(jī)分成空白對(duì)照組、高濃度、中濃度和低濃度中藥組4組，每組6只，每日不同濃度中藥灌胃。四組分別在光凝后7、14、21d隨機(jī)選取2只大鼠行眼底照像、FFA檢查。眼球標(biāo)本行組織病理切片光鏡、Ⅷ免疫組織化學(xué)染色觀察。
　　 3.比較中濃度涼血化瘀中藥與曲胺耐德(triamci

5、nolone acetonide，TA)對(duì)氪激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV形態(tài)的影響。
　　 659nm激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV模型同1，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(16只)，中藥組(16只)，曲胺耐德組(16只)?？瞻讓?duì)照組每日生理鹽水灌胃，中藥組每日中藥灌胃，曲胺耐德組術(shù)后第2d玻璃體腔內(nèi)注射5μL(0.2mg)曲胺耐德。在光凝后7，14，21，28d每組隨機(jī)選取3只大鼠行熒光素眼底血管造影(FFA)檢查，檢查后處死，取眼球行HE染色，Ⅷ因子

6、相關(guān)抗原免疫組織化學(xué)檢測(cè)；同時(shí)，每組選取1只大鼠做脈絡(luò)膜血管鋪片檢查。
　　 4.評(píng)價(jià)涼血化瘀中藥及TA對(duì)氪激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV中基質(zhì)金屬蛋白酶—9(Matrixmetalloproteinase9，MMP—9)和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(tissue inhibitor ofmetalloproteinase2，TIMP—2)表達(dá)的影響。
　　 659nm激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV模型同1，隨機(jī)分成空白對(duì)照組，中藥組和TA組

7、各12只。分別在光凝后7，14，21，28d隨機(jī)選取3只大鼠處死，摘除眼球，行病理切片及免疫組織化學(xué)檢測(cè)MMP—9及TIMP—2蛋白在CNV組織中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 一、臨床病例觀察：
　　 末次隨訪時(shí)，中藥組46眼中，視力平均提高0.21，較治療前有統(tǒng)計(jì)意義；視力≥4.7者33眼(71.7％)；視力提高≥2行的25眼(54.3％)，視力波動(dòng)在1行以內(nèi)者16只眼(34.8％)，視力下降≥2行的5眼(10

8、.9％)，較治療前視力明顯提高。病灶直徑、病灶面積，中央視網(wǎng)膜厚度與治療前相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的改變，黃斑容積較治療前降低。FFA檢查發(fā)現(xiàn)：顯效(CNV閉合)34眼(73.9％)，有效(CNv部分閉合)7眼(15.2％)，進(jìn)步(CNV小部分閉合)4眼(8.7％)，無(wú)效(CNV擴(kuò)大)0眼，較治療前顯著改善。OCT檢查發(fā)現(xiàn)：CNV型別由治療前活動(dòng)期38眼(82.6％)、中間期8眼(17.4％)，轉(zhuǎn)變?yōu)橛行?瘢痕期)38眼(82.6％)，進(jìn)步(

9、中間期)6眼(13.1％)，無(wú)效(活動(dòng)期)2眼(4.4％)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 聯(lián)合組15眼中，視力平均提高0.12，視力分布及視力提高的情況較治療前無(wú)明顯改善，病灶直徑、病灶面積、中央視網(wǎng)膜厚度及黃斑容積與治療前相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的變化。FFA檢查發(fā)現(xiàn)：顯效(CNV閉合)13眼(86.7％)，有效(CNV部分閉合)1眼(6.7％)，無(wú)效(CNV擴(kuò)大)1眼(6.7％)，較治療前顯著改善。OCT檢查發(fā)現(xiàn)：CNV型別由治療前活

10、動(dòng)期7眼(46.7％)、中間期4眼(26.7％)、瘢痕期4眼(26.7％)均可出現(xiàn)，轉(zhuǎn)變?yōu)橛行?瘢痕期)13眼(86.7％)，進(jìn)步(中間期)1眼(6.7％)，無(wú)效(活動(dòng)期)1眼(6.7％)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 陳舊組9眼，治療后，病人主訴視疲勞的癥狀減輕，視力平均提高0.11，視力提高≥2行者3眼(33.3％)，但是，與治療前相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病灶情況與治療前相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究：
　　

11、 1.659nm激光(360mW，50μm，0.05s)照射BN大鼠視網(wǎng)膜20點(diǎn)后，7～21d顯示FFA晚期熒光素滲漏及光鏡下CNV厚度逐漸增加，28d時(shí)FFA滲漏和CNV厚度開(kāi)始減少。
　　 2.FFA顯示：光凝后7～21d，空白對(duì)照組CNV滲漏面積逐漸增大，而中藥組滲漏面積增加無(wú)明顯差異；至21d，中、低濃度中藥組滲漏面積明顯低于空白對(duì)照組和高濃度中藥組，以中濃度中藥組CNV滲漏面積最小。CNV厚度變化：空白對(duì)照組7～21d

12、逐漸增厚，至21d達(dá)到高峰；而中藥組至14d CNV厚度達(dá)到高峰，14～21d CNV厚度變薄，以中濃度中藥組CNV厚度最薄。
　　 3.FFA顯示：光凝后7～28d，空白對(duì)照組CNV滲漏面積逐漸增大，而中藥組滲漏面積略增加，TA組瘢痕著色明顯。CNV厚度：空白對(duì)照組逐漸增加，至21d達(dá)高峰，28d略有下降；中藥組CNV厚度逐漸增加，至14d達(dá)到高峰，21d時(shí)明顯變薄，28d再次增加；TA組7～14d時(shí)CNV逐漸變薄，至14d時(shí)

13、最薄，此后CNV再次增厚。Ⅷ因子相關(guān)抗原陽(yáng)性反應(yīng)物吸光度：空白對(duì)照組7～14d時(shí)逐漸增加，至14d達(dá)到高峰，此后下降；中藥組7d時(shí)達(dá)到高峰，此后下降；TA組亦是14d達(dá)到高峰，但峰值較空白對(duì)照組低，此后下降。脈絡(luò)膜血管鋪片CNV面積：空白對(duì)照組7～28d逐漸增大；中藥組7～14d達(dá)到高峰，14～21d下降，28d時(shí)再次增加；TA組7～14dCNV面積逐漸增加，21，28d時(shí)瘢痕明顯。
　　 4.空白對(duì)照組在光凝后7d MMP—9

14、達(dá)到高峰，此后逐漸下降;中藥組在光凝后14d達(dá)到高峰，但峰值低于空白對(duì)照組，此后逐漸下降；曲胺奈德組在光凝后7d達(dá)到高峰，峰值介于空白對(duì)照組和中藥組之間，此后逐漸下降，在14～21d出現(xiàn)平臺(tái)期?？瞻讓?duì)照組在光凝后14d TIMP—2達(dá)到高峰，此后逐漸下降；中藥組在光凝后14d達(dá)到高峰，峰值高于空白對(duì)照組，此后逐漸下降；曲胺奈德組在光凝后14d達(dá)到高峰，峰值介于空白對(duì)照組和中藥組之間，此后下降。
　　 結(jié)論：
　　 一、臨

15、床病例觀察：
　　 中藥涼血化瘀方可以促進(jìn)CEC中CNV閉合，可以促進(jìn)經(jīng)過(guò)西醫(yī)治療后仍有CNV滲漏的CEC患者CNV閉合，可能改善陳舊CEC患者的視疲勞癥狀。
　　 二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究：
　　 1.氪激光誘導(dǎo)BN大鼠的CNV模型是一種較為理想的模型，F(xiàn)FA及CNV厚度分析是CNV定量研究的有效手段。
　　 2.中濃度涼血化瘀中藥可以有效抑制氪激光誘導(dǎo)BN大鼠的CNV增生，防止CNV滲漏。
　　 3.