RECK、MMP-2、TIMP-2和P21ras在喉癌中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的:喉癌是耳鼻咽喉-頭頸外科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。喉癌的發(fā)生與其它惡性腫瘤一樣,是由多種基因的表達(dá)水平的改變而引起的。伴有Kazal域的富含半胱氨酸的逆轉(zhuǎn)誘導(dǎo)蛋白(reversion-inducing-cystein-richprotein with kazalmotifs,RECK)基因是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄抑制基因,可以通過(guò)抑制多種MMPs的表達(dá),抑制腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases,

2、MMPs)可以降解細(xì)胞外基質(zhì),有研究表明,MMP2的表達(dá)水平同腫瘤的侵襲和惡性程度密切相關(guān),TIMP-2作為MMP-2的抑制劑,通過(guò)多種方式抑制MMP-2的活性。同時(shí)RECK受到P21ras等多種癌基因的調(diào)控。本研究通過(guò)測(cè)定RECK、MMP-2、TIMP-2和P21ras在喉癌、癌旁及正常組織中的表達(dá)及其相互關(guān)系,探討喉癌的發(fā)生及其侵襲轉(zhuǎn)移。
　　 方法:
　　 1應(yīng)用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistr

3、y,IHC)S-P法檢測(cè)40例喉癌組織、15例癌旁組織和15例正常喉粘膜中RECK及MMP-2、TIMP-2、P21ras的表達(dá)情況。
　　 2應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometrye,FCM)的方法定量檢測(cè)40例喉癌組織、15例癌旁組織和15例正常喉粘膜組織中RECK及MMP-2、TIMP-2的含量。
　　 3運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以P≤0.05為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義,P≤0.01

4、為差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有非常顯著性意義。
　　 結(jié)果:
　　 1 RECK蛋白的表達(dá)
　　 1.1免疫組化法:應(yīng)用S-P法檢測(cè)喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中RECK的表達(dá)強(qiáng)度呈上升趨勢(shì),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進(jìn)一步兩兩比較,喉癌組織中的RECK表達(dá)均低于正常組(P＜0.01)與癌旁組(P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,RECK蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.0

5、5)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(jí)(P＜0.05)有關(guān),而與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　 1.2流式細(xì)胞術(shù):檢測(cè)RECK蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達(dá)量(FI值)分別為0.8682±1:0.1961、0.9889±0.1785、1.1200±0.1153,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中RECK蛋白的表達(dá)量明顯低于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P

6、＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,RECK蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(jí)(P＜0.05)有關(guān)。
　　 2 MMP-2蛋白的表達(dá)
　　 2.1免疫組化法:應(yīng)用S-P法檢測(cè)喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中MMP-2蛋白的表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢(shì),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進(jìn)一步兩兩比較,喉癌組MMP-2蛋白的表達(dá)高于正常組(P＜0

7、.01)與癌旁組(P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,MMP-2蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(jí)(P＜0.01)有關(guān),與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　 2.2流式細(xì)胞術(shù):檢測(cè)MMP-2蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達(dá)量(FI值)分別為2.6088±0.1954、1.0322±0.1577、0.6811

8、±0.1732,相比三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中MMP-2蛋白的表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,MMP-2蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.05)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(jí)(P＜0.01)有關(guān)。
　　 3 TIMP-2蛋白的表達(dá)
　　 3.1免疫組化法:應(yīng)用S-P法檢測(cè)喉癌組織、癌旁組織

9、及正常粘膜中TIMP-2的表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢(shì),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進(jìn)一步兩兩比較,喉癌組織中的TIMP-2表達(dá)均高于正常組(P＜0.01)與癌旁組(P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,TIMP-2蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.01)及病理分級(jí)(P＜0.01)有關(guān),而與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　 3.2流

10、式細(xì)胞術(shù):檢測(cè)TIMP-2蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中的表達(dá)量(FI值)分別為3.6077±0.1966、1.1125±0.1672、0.6080±0.1987,三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。喉癌組織中TIMP-2蛋白的表達(dá)量明顯高于癌旁組織(P＜0.01)及正常喉粘膜組織(P＜0.01),而癌旁組織與正常喉粘膜相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,TIMP-2蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P

11、＜0.01)及病理分級(jí)(P＜0.01)有關(guān)。
　　 4 P21ras蛋白的表達(dá):應(yīng)用S-P法檢測(cè)喉癌組織、癌旁組織及正常粘膜中P21ras的表達(dá)強(qiáng)度呈下降趨勢(shì),三組相比有顯著性差異(P＜0.01)。進(jìn)一步兩兩比較,喉癌組織中的P21ras表達(dá)均高于正常組(P＜0.01)與癌旁組(P＜0.01),而正常組與癌旁組相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在喉癌組織中,P21ras蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)、臨床分期(P＜0.05

12、)及病理分級(jí)(P＜0.01)有關(guān),而與臨床分型、腫瘤大小、吸煙量、年齡和性別無(wú)關(guān)(P＞0.05)。
　　 5 RECK與MMP-2、TIMP-2、P21ras在喉癌組織中的相關(guān)性
　　 5.1 RECK與MMP-2的相關(guān)性:RECK蛋白表達(dá)量(FI值)與MMP-2蛋白表達(dá)量(FI值)呈直線負(fù)相關(guān),直線回歸方程Y=-2.206X+4.076(r=0.895,P=0.000)。
　　 5.2 RECK與TIMP-2無(wú)

13、相關(guān)性(r=-0.208,P=-0.198＞0.05)。
　　 5.3 RECK與P21ras呈負(fù)相關(guān)(r=-0.332,P=-0.036＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1 RECK蛋白、MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白和P21ras蛋白在喉癌組織、癌旁組織及正常喉粘膜組織中均有表達(dá)。
　　 2 MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白和P21ras蛋白在喉癌組織中的定性表達(dá)均明顯高于癌旁組織及正常喉粘膜組織

14、,RECK蛋白在喉癌組織中的定量及定性表達(dá)均明顯低于癌旁組織及正常喉粘膜組織,可能與喉癌的發(fā)生有關(guān)。
　　 3 RECK蛋白、MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白和P21raS蛋白在喉癌組織中的表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分級(jí)有相關(guān)性;與臨床分型、腫瘤大小、年齡、吸煙量和性別無(wú)關(guān)。提示四種蛋白可能與喉癌的侵襲與轉(zhuǎn)移有關(guān)。
　　 4 RECK和MMP-2在喉癌組織中的蛋白表達(dá)呈直線負(fù)相關(guān),RECK與TIMP-2無(wú)直線相關(guān)性