眼科抗菌藥物諾氟沙星和加替沙星對人角膜內(nèi)皮細胞的凋亡誘導作用研究.pdf

1、隨著眼表炎癥的日益增多，抗菌消炎類眼藥在眼表感染中應用也越來越廣泛。諾氟沙星和加替沙星分別屬于第三代和第四代喹諾酮類藥物，具有抗菌作用強、抗菌譜廣等優(yōu)點，已在臨床眼科細菌性感染治療中廣泛應用，但其引起的毒副作用也日益凸顯，該藥物對角膜的毒副作用也越來越受到研究者的關(guān)注。而角膜內(nèi)皮層作為角膜基質(zhì)和前房間的屏障，對維持角膜的透明性起到至關(guān)重要的作用，哺乳動物角膜內(nèi)皮細胞（除兔外）在成年后即失去再生能力，一旦損傷就無法修復，而目前關(guān)于諾氟沙星

2、和加替沙星對角膜內(nèi)皮細胞影響作用的研究主要是以動物或臨床應用為研究對象，耗資大周期長，具有一定的風險，在很大程度上制約了研究的范圍及進程，且至今仍未見有關(guān)該類藥物對體外培養(yǎng)的角膜內(nèi)皮細胞毒性作用機理的研究報道，因此本文研究諾氟沙星和加替沙星對角膜內(nèi)皮細胞的毒性作用及其機理。
　　本文選用諾氟沙星和加替沙星兩種喹諾酮類藥物為實驗藥物，利用本實驗室自建的非轉(zhuǎn)染、無致瘤性人角膜內(nèi)皮（Human Corneal Endothelium，H

3、CE）細胞系細胞為材料，通過光鏡觀察、AO/EB熒光雙染色、瓊脂糖凝膠電泳檢測、透射電鏡觀察研究喹諾酮類抗菌藥物對體外培養(yǎng)的HCE細胞的影響，并以家貓作為實驗動物進行在體檢測和離體鑒定。根據(jù)體外和體內(nèi)實驗的研究結(jié)果準確評價兩種喹諾酮類抗菌藥物對 HCE細胞的毒性作用，進一步為諾氟沙星和加替沙星的臨床應用提供實驗依據(jù)。
　　體外實驗表明諾氟沙星和加替沙星分別在0.75~3 g/L和0.375~3 g/L的濃度范圍內(nèi)能誘導體外培養(yǎng)的H

4、CE細胞發(fā)生凋亡，細胞出現(xiàn)不同程度的皺縮、空泡化、變圓、質(zhì)膜通透性提高、DNA斷片化、產(chǎn)生凋亡小體等變化，且具有濃度和時間依賴性。家貓在體檢測結(jié)果表明臨床濃度（3 g/L）的諾氟沙星和加替沙星對家貓給藥20天后，角膜內(nèi)皮細胞密度降低，平均面積增大，與第0天時存在顯著性差異（P<0.05）；面積變異系數(shù)和六角形細胞比率分別有所上升和下降，但與第0天相比無顯著差異（P>0.05）。此外，與諾氟沙星給藥組相比加替沙星給藥后家貓角膜內(nèi)皮細胞各項