丹參多組分藥代動力學(xué)研究及其制劑的質(zhì)量評價.pdf

1、目的： (1)分別建立簡單、靈敏的反相高效液相色譜方法(RP-HPLC)，對丹參酮I以及丹參醇提物中多組分在大鼠的血藥濃度進(jìn)行測定，并將其應(yīng)用于藥動學(xué)研究中。 (2)考察復(fù)方丹參片對大鼠的肝藥酶CYP450的影響。 (3)建立一種高效液相色譜-二極管陣列檢測器-蒸發(fā)光散射檢測器聯(lián)用技術(shù)，用于復(fù)方丹參片中多元組分的定量測定。 方法：（1） 采用VP-ODS C18柱(4.6mmx250mm；5μm)

2、，以甲醇-0.05mol·L-1醋酸銨緩沖溶液(醋酸調(diào)pH至2.5)(70:30，v/v)為流動相，流速1.0mL·min-1，檢測波長263nm，柱溫40℃，以丙酸睪丸素為內(nèi)標(biāo)，給大鼠灌胃丹參的醇提取物后，通過股動脈插管的方式采集不同時間的血樣，測定血漿四種丹參酮的濃度，并估算藥動學(xué)參數(shù)。 (2)以非那西丁為探針?biāo)幬?，四組大鼠分別灌胃給予生理鹽水(空白對照組)、西咪替丁(酶抑制劑組)、苯巴比妥鈉(酶誘導(dǎo)劑組)和復(fù)方丹參片(受試

3、藥物組)后，均連續(xù)給藥7天，于第8日早晨腹腔注射探針?biāo)幬锓悄俏鞫?，于不同時間點采集血樣，用HPLC法測定血漿中探針?biāo)幬餄舛?，用DAS軟件估算各組探針?biāo)幬锼巹訉W(xué)參數(shù)。 (3)應(yīng)用HPLC-DAD-ELSD聯(lián)用技術(shù)，根據(jù)各類成分紫外吸收光譜的差異，分別在287，246，263，292和268nm波長下檢測丹酚酸B、二氫丹參酮、隱丹參酮、丹參酮I、次甲基丹參酮和丹參酮ⅡA，同時采用ELSD對5中皂苷(三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、Re

4、、Rb1和Rd)進(jìn)行測定。 結(jié)論： (1)建立的高效液相色譜法簡便、可靠、準(zhǔn)確，可用于生物樣品中丹參中多組分的血藥濃度分析和藥代動力學(xué)研究。丹參酮I和次甲基丹參酮的藥動學(xué)過程尚屬首次報道。 (2)由于復(fù)方丹參片在臨床上使用廣泛，且用藥周期長，因此提示：在和經(jīng)肝藥酶代謝的西藥聯(lián)合使用過程中，應(yīng)注意中西藥的合理配伍。 (3)本實驗建立的HPL,C-DAD-ELSD聯(lián)用技術(shù)和化學(xué)計量學(xué)相結(jié)合的方法能對中藥復(fù)方制

5、劑的質(zhì)量進(jìn)行科學(xué)的評價，該方法為中藥復(fù)方復(fù)雜體系的多組分定量測定和質(zhì)量控制提供了一種可靠、簡便易行的方法模式。 創(chuàng)新性： (1)首次建立了同時測定大鼠血漿中四種丹參酮濃度的RP-HPLC方法，其中丹參酮I和次甲基丹參酮在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究尚屬首次。 (2)首次研究了復(fù)方丹參片對大鼠肝藥酶CYP450的影響。 (3)首次采用HPLC-EISD聯(lián)用技術(shù)，測定了復(fù)方丹參片中的11個活性成分，并結(jié)合化學(xué)計量