隱丹參酮在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的及內(nèi)容:該實(shí)驗(yàn)作為隱丹參酮Ⅰ類新藥開發(fā)的一部分,目的在于建立檢測動(dòng)物體內(nèi)隱丹參酮濃度的方法,并運(yùn)用該方法研究大鼠口服隱丹參酮純品及不同隱丹參酮制劑的藥代動(dòng)力學(xué)行為,為藥物的臨床前研究提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù).實(shí)驗(yàn)分為四個(gè)部分:(1)建立檢驗(yàn)大鼠生物樣本隱丹參酮濃度的快速、靈敏、穩(wěn)定性好的HPLC法;(2)大鼠口服隱丹參酮的相對(duì)生物利用度的研究;(3)幾種隱丹參酮制劑的篩選;(4)大鼠口服低、中、高三個(gè)劑量隱丹參酮的藥時(shí)曲線.3.方法:HPLC法

2、以氟西汀(fluoxetine FXT)為內(nèi)標(biāo),依利特C18色譜柱(4.6×150mm,5 μ m)作為固定相,流動(dòng)相為72％的甲醇,28%的硼酸/氯化鉀緩沖液(PH=9.4),流速1.2ml/min,紫外檢測波長270nm.取大鼠血漿或組織勻漿,按比例加入2.0mg/ml vitC溶液以抗氧化,加入內(nèi)標(biāo)渦旋后,加入三倍體積乙醚,靜置后離心,吸取上清液.室溫下真空揮干,甲醇水溶液溶解殘?jiān)?去蛋白處理后進(jìn)樣.選用SD大鼠進(jìn)行隱丹參酮純品的

3、相對(duì)生物利用度研究,大鼠分別腹腔注射及口服隱丹參酮純品后于不同時(shí)間點(diǎn)從尾尖采血,通過比較藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)探討隱丹參酮純品在大鼠體內(nèi)是否存在吸收;接著用同樣的方法進(jìn)行了3種隱丹參酮制劑的篩選,最后篩選出吸收最佳的制劑(2＃)進(jìn)行大鼠口服三個(gè)劑量組隱丹參酮制劑的實(shí)驗(yàn).SD大鼠于實(shí)驗(yàn)前一天乙醚麻醉,行右側(cè)頸靜脈插管手術(shù),禁食12小時(shí)后于次日按低、中、高三個(gè)劑量組口服給藥,給藥后不同時(shí)間點(diǎn)由右頸靜脈插管取血.每次取血后立即于插管處補(bǔ)充與取血量相當(dāng)

4、的肝素生理鹽水或新鮮血液.采集的血樣置于肝素化EP管中加入一定量的抗氧化劑,分離血漿,-20℃保存至處理.結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)建立了一種良好的HPLC方法用于測定大鼠生物樣本中隱丹參酮的濃度,該分析方法靈敏準(zhǔn)確、重復(fù)性好、可信性高、簡便且易于推廣,能滿足藥物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)的研究.隱丹參酮純品口服給藥在體內(nèi)存在吸收但生物利用度較低且吸收不規(guī)則;進(jìn)行制劑改良后,2＃制劑的體內(nèi)吸收最優(yōu).大鼠口服2＃制劑的血漿藥物濃度-時(shí)間曲線呈雙峰特征;隱丹