抗牛支原體及巴氏桿菌性肺炎二聯(lián)卵黃抗體的制備及應(yīng)用效果研究.pdf

1、由牛支原體和多殺性巴氏桿菌混合感染引起的犢牛肺炎和關(guān)節(jié)炎,可導(dǎo)致大量犢牛的死亡及嚴重的經(jīng)濟損失。因國內(nèi)尚無理想的疫苗對其進行有效的預(yù)防,抗菌藥物易產(chǎn)生耐藥性及效果不穩(wěn)定。本研究旨在制備抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌的卵黃抗體并進行臨床應(yīng)用觀察,為本病提供新的防治方法。研究結(jié)果如下:
　　1、抗牛支原體高免卵黃抗體的制備:首免采用弗氏完全佐劑滅活苗免疫蛋雞,劑量為0.5mg/只,首免后第15、30、45d采用弗氏不完全佐劑滅活苗進行加強

2、免疫,劑量分別為1mg/只、1.5mg/只、2mg/只。通過間接ELISA的方法檢測卵黃抗體效價,結(jié)果表明:在首免后第15d卵黃抗體效價不斷增高,免疫后第60d達到高峰,效價為1:128000,并維持30d以上效價開始下降。
　　2、抗牛多殺性巴氏桿菌高免卵黃抗體的制備:首免采用弗氏完全佐劑滅活苗免疫蛋雞,劑量為15億/只,首免后第10、20、30d采用弗氏不完全佐劑滅活苗加強免疫,劑量為30億/只。采用已建立的IHA方法檢測卵黃

3、抗體效價,結(jié)果表明:在首免后第3周出現(xiàn)抗體并且效價不斷增高,免疫后第7周抗體效價達到高峰,效價為1:1024,持續(xù)5周開始下降。
　　3、抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌二聯(lián)IgY的制備:通過對水稀釋法、氯仿法和卡拉膠法三種提取IgY方法的比較,結(jié)果表明:采用卡拉膠結(jié)合硫酸銨沉淀法提取卵黃抗體IgY,操作簡便、時間短、IgY得率較高,可作為卵黃抗體IgY的首選提取方法;無菌檢測及動物安全性實驗表明制備的IgY安全可靠。
　　4、高