β淀粉樣蛋白對(duì)星型膠質(zhì)細(xì)胞ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)調(diào)控及膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)等功能改變?cè)诎柎暮Ｄ≈械淖饔?pdf

1、目的：β淀粉樣蛋白（β-amyloid，Aβ）為阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s Disease，AD）的核心因素，但Aβ相關(guān)的生理、病理、以及細(xì)胞機(jī)制等仍存在許多未知的因素，其中突出一點(diǎn)為Aβ是否在一定程度上具有良性作用或生理學(xué)意義，而不是一味起著破壞性作用。本論文立足于近年來(lái)在ATP結(jié)合盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ATP-binding cassette transporter，ABCT)與膽固醇代謝以及AD發(fā)病機(jī)制的相關(guān)研究進(jìn)展，探討Aβ對(duì)

2、星型膠質(zhì)細(xì)胞ABCA1，ABCG1和ABCC1表達(dá)與功能的潛在調(diào)控作用及所涉及的細(xì)胞與分子機(jī)制，以及Aβ在AD病理發(fā)展的不同階段所起作用的差異。
　　方法：5xFAD轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)的Aβ在1.5月齡即開(kāi)始過(guò)度生成與沉積，是目前很好的AD動(dòng)物模型。本研究選擇該動(dòng)物模型，綜合使用免疫組化，細(xì)胞培養(yǎng)，western blot，定量PCR，高效液相色譜，離子成像等技術(shù)，并結(jié)合對(duì)受體與胞內(nèi)信號(hào)通路的藥理學(xué)干預(yù)方法，系統(tǒng)性地對(duì)Aβ對(duì)星型膠質(zhì)細(xì)

3、胞ABCA1，ABCG1和ABCC1的表達(dá)調(diào)控，對(duì)膽固醇代謝的影響，以及膽固醇調(diào)節(jié)對(duì)以谷氨酸內(nèi)穩(wěn)態(tài)為代表的星型膠質(zhì)細(xì)胞功能的影響進(jìn)行研究。
　　結(jié)果：⑴在對(duì)照組小鼠腦內(nèi)，ABCA1，ABCG1和ABCC1隨著小鼠月齡增加略有升高或基本保持穩(wěn)定狀態(tài)，而在5xFAD小鼠腦內(nèi)，緊隨Aβ的升高，ABCA1，ABCG1和ABCC1的表達(dá)在2月齡前后迅速升高，達(dá)到同齡對(duì)照組的數(shù)倍，于4.5月齡前后達(dá)到峰值后開(kāi)始顯著下降，在7月齡后降到低于對(duì)照

4、組的表達(dá)水平。⑵在培養(yǎng)的對(duì)照組小鼠皮層星型膠質(zhì)細(xì)胞上，外源性地分別給予寡聚肽Aβ，纖絲狀A(yù)β，單體Aβ干預(yù)均能引起ABCA1，ABCG1和ABCC1mRNA和蛋白水平的升高，其中以單體Aβ增高最為明顯，且呈劑量與時(shí)間依賴性。⑶Aβ可通過(guò)激活類視黃醇X受體（retinoid X receptor，RXR）誘導(dǎo)星型膠質(zhì)細(xì)胞ABCA1和ABCG1表達(dá)增加。⑷該研究首次揭示ABCA1和ABCG1在蛋白穩(wěn)定性上具有極其顯著的區(qū)別，ABCG1的半衰

5、期比ABCA1的長(zhǎng)10倍以上。⑸表達(dá)于星型膠質(zhì)細(xì)胞的甲酰肽受體（formyl peptide receptor，F(xiàn)PR）是Aβ誘導(dǎo)ABCA1和ABCG1表達(dá)的主要途徑，其中FPR1和FPR2受體亞型的激活都有參予，對(duì)其中任何一個(gè)亞型的阻斷均可抑制單體Aβ的刺激作用。⑹藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（Peroxisome proliferator-activated receptor)中能顯著影響星膠合成ABCA1和ABCG1的

6、是PPARα亞型而非PPARγ亞型。⑺Aβ刺激可使得星膠釋放膽固醇的能力顯著升高，尤其是在與貝沙羅汀協(xié)同作用下，膽固醇釋放的增高可以顯著降低胞內(nèi)膽固醇含量，并影響星膠的谷氨酸內(nèi)穩(wěn)態(tài)，促進(jìn)胞外谷氨酸的升高。⑻Aβ刺激可使得星膠分泌谷胱甘肽水平增高。
　　結(jié)論：通過(guò)激活FPR受體，且與RXR受體，PPAR等的協(xié)同作用下，Aβ可誘導(dǎo)星膠ABCA1和ABCG1表達(dá)增加，進(jìn)而有助于增加星膠對(duì)神經(jīng)元膽固醇的供應(yīng)，以彌補(bǔ)Aβ對(duì)神經(jīng)元膽固醇合成的