大鼠誘發(fā)性肝癌模型中血管生成擬態(tài)現(xiàn)象觀察及其形成機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)建立具有轉(zhuǎn)移潛能的大鼠誘發(fā)性肝癌模型，觀察在誘發(fā)性肝癌中的血管生成擬態(tài)現(xiàn)象，分析其與肝癌分化程度、侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。通過(guò)比較典型的肝炎、肝硬化、肝癌及轉(zhuǎn)移等不同階段中基質(zhì)金屬蛋白酶-2（ matrixmetalloproteinases-2 MMP-2）和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑-2（tissue inhibitor ofmetalloproteinase-2 TIMP-2）的表達(dá)差異，以及在有無(wú)血管生成擬態(tài)的不同肝癌組織標(biāo)本

2、中的MMP-2和TIMP-2的表達(dá)差異，從而探討MMP-2/TIMP-2比例關(guān)系在血管生成擬態(tài)現(xiàn)象形成機(jī)制中的作用。
　　 方法：建立二乙基亞硝胺和N-亞硝基嗎啉聯(lián)合誘導(dǎo)的具有轉(zhuǎn)移潛能的雄性SD大鼠肝癌模型。通過(guò)HE 染色、免疫組化、透射電子顯微鏡等手段描述血管生成擬態(tài)現(xiàn)象并分析其與肝癌分化程度、侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。RT-PCR 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MMP-2、TIMP-2基因轉(zhuǎn)錄水平在不同肝臟組織中的表達(dá)差異。Western Blot 實(shí)驗(yàn)

3、檢測(cè)MMP-2、TIMP-2 蛋白水平在不同肝臟組織中的表達(dá)差異。免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MMP-2、TIMP-2 蛋白水平在不同肝臟組織中的表達(dá)水平和表達(dá)部位的差異。對(duì)比分析有無(wú)血管生成擬態(tài)的肝癌組織標(biāo)本中MMP-2/TIMP-2的比例關(guān)系。
　　 結(jié)果：成功構(gòu)建了具有肝內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移的雄性SD 大鼠誘發(fā)性肝癌動(dòng)物模型，并在誘發(fā)性肝癌模型標(biāo)本中觀察到血管生成擬態(tài)現(xiàn)象。分化級(jí)別低的肝癌組織比分化級(jí)別高的肝癌組織中血管生成擬態(tài)現(xiàn)象多見(jiàn)，兩組血

4、管生成擬態(tài)的陽(yáng)性率分別為61.3％、8.3％，兩組之間陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=9.75，P<0.05)，在有肝內(nèi)播散轉(zhuǎn)移的肝癌組織標(biāo)本中血管生成擬態(tài)現(xiàn)象較無(wú)轉(zhuǎn)移的肝癌組織標(biāo)本多見(jiàn)，兩組血管生成擬態(tài)陽(yáng)性率分別為60.7％、2.0％，兩組之間陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=6.51，P<0.05)。MMP-2、TIMP-2在肝炎、肝硬化、肝癌及肝內(nèi)轉(zhuǎn)移等階段表達(dá)呈進(jìn)行升高趨勢(shì)。在基因轉(zhuǎn)錄、蛋白表達(dá)等水平上，有血管生成擬態(tài)的肝癌組織中MM