系統(tǒng)性硬化癥外周血microRNA表達(dá)譜的初步研究.pdf

1、背景：
　　 系統(tǒng)性硬化癥(systemic sclerosis，SSc)是一種不明原因的彌漫性結(jié)締組織病，臨床上以皮膚增厚和纖維化為主要特征，還可累及肺、消化道、腎和心臟等多個器官。SSc的發(fā)病機(jī)制不明，目前認(rèn)為主要涉及微血管損傷、纖維化和自身免疫系統(tǒng)異常這三個方面，對其發(fā)病機(jī)制的深入研究將有助于提高臨床診治水平。microRNAs(miRNA)是一類內(nèi)源性非編碼小分子單鏈RNA，通過與靶基因的信使RNA（messenger

2、RNA，mRNA）結(jié)合，促使mRNA降解或抑制其翻譯，從而抑制靶基因的表達(dá)，廣泛參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、凋亡和組織器官發(fā)育等生物學(xué)過程。目前已經(jīng)證實miRNA的異常表達(dá)與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。與SSc發(fā)病相關(guān)的miRNA研究目前尚很缺乏。
　　 目的：
　　 采用高通量miRNA芯片技術(shù)篩選SSc患者PBMC中差異性表達(dá)的miRNAs，通過生物信息學(xué)分析，挑選與SSc密切相關(guān)的miRNAs，在大樣本量SSc患者中進(jìn)

3、行驗證，并探尋miRNA表達(dá)水平與SSc患者臨床特征的相關(guān)性。
　　 方法：
　　 1．通過miRNA表達(dá)譜芯片檢測4例初治SSc患者及4例健康對照PBMC中的miRNA表達(dá)譜，應(yīng)用分層聚類分析篩選出SSc患者中差異性表達(dá)的miRNAs。
　　 2．通過文獻(xiàn)檢索和生物信息學(xué)分析，挑選出與SSc相關(guān)的miRNAs，進(jìn)行靶基因預(yù)測及信號通路分析。
　　 3．應(yīng)用real-time PCR方法驗證上述miRNA

4、s在大樣本SSc患者中的表達(dá)情況，分析其表達(dá)水平與臨床特征及實驗室指標(biāo)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1．MiRNA芯片在初治SSc的PBMC中篩選出47個差異性表達(dá)的miRNAs，其中29個表達(dá)上調(diào)，18個表達(dá)下調(diào)。
　　 2．通過文獻(xiàn)檢索和生物信息學(xué)分析，挑選出miR-29a、miR-125b和miR-140與SSc相關(guān)的miRNAs。
　　 3．Real-timePCR證實miR-29a和miR-1

5、25b在SSc患者PBMC中表達(dá)水平顯著低于健康對照。miR-140在SSc患者中無差異性表達(dá)。
　　 4．SSc患者PBMC中miR-125b的表達(dá)水平與PASP及hsCRP相關(guān)，與臨床癥狀及其他實驗室指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性。
　　 結(jié)論：研究結(jié)果表明SSc患者PBMC中存在差異性表達(dá)的miRNAs，其異常表達(dá)可能是SSc的發(fā)病機(jī)制之一。miR-29a和miR-125b的表達(dá)水平在SSc患者中顯著降低，并與特定臨床特征