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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:采用戊四氮(Pentamethazol,PTZ)點(diǎn)燃癲癇大鼠模型,觀察海馬中轉(zhuǎn)錄因子Kruppe樣因子4(Krüppel-like factor4,KLF4)的表達(dá)變化,結(jié)合海馬苔蘚纖維出芽(Mossy fibersprouting,MFS)的動(dòng)態(tài)改變,探討其在癲癇發(fā)生過(guò)程中的可能作用。
方法:清潔級(jí)健康成年雄性SD大鼠90只,隨機(jī)分為戊四氮實(shí)驗(yàn)組和生理鹽水對(duì)照組,其中戊四氮實(shí)驗(yàn)組60只,生理鹽水對(duì)照組30只。戊四氮組腹
2、腔注射PTZ30mg/kg,每天一次,對(duì)照組同時(shí)注射等量生理鹽水。按第一次腹腔注射后3天、1周、2周、4周和6周在兩組內(nèi)隨機(jī)平均分為5個(gè)亞組,每個(gè)亞組再隨機(jī)平均分為兩個(gè)小組:一組用于免疫組化,檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)大鼠海馬中的KLF4表達(dá);另一組用于Timm染色,檢測(cè)苔蘚纖維出芽情況。
結(jié)果:
1.動(dòng)物模型
大鼠多在連續(xù)注射PTZ21~28天后被點(diǎn)燃,平均24.5±2.3天。模型點(diǎn)燃率為100%,死亡率為2.2%。實(shí)
3、驗(yàn)組大鼠成功點(diǎn)燃后出現(xiàn)誘發(fā)發(fā)作及自發(fā)發(fā)作;對(duì)照組未出現(xiàn)任何癇性發(fā)作。
2.KLF4蛋白的表達(dá)
對(duì)照組大鼠海馬CA1、CA3、齒狀回區(qū)KLF4蛋白表達(dá)在3天后逐漸升高,至1周時(shí)達(dá)高峰,并持續(xù)至第6周;實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬CA1、CA3、齒狀回區(qū)KLF4蛋白表達(dá)在第3天后未升高,而是保持在穩(wěn)定水平,持續(xù)至第6周。兩組間CA1區(qū)KLF4蛋白表達(dá)在3天、1周時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;CA3區(qū)僅1周組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;齒狀回區(qū)在1周和2周組有統(tǒng)計(jì)
4、學(xué)差異;余各區(qū)各時(shí)間點(diǎn)兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
3.苔蘚纖維出芽的動(dòng)態(tài)變化
實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬CA3區(qū)苔蘚纖維出芽與對(duì)照組CA3區(qū)相比,從第3天開(kāi)始實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)苔蘚纖維出芽,評(píng)分逐漸增加,至第2周開(kāi)始兩組間出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),至第6周時(shí)達(dá)高峰。實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬齒狀回區(qū)苔蘚纖維出芽與對(duì)照組齒狀回區(qū)相比,從第4周開(kāi)始實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)苔蘚纖維出芽,評(píng)分逐漸增加,至第6周時(shí)達(dá)高峰并在兩組間出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。對(duì)照組大鼠
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