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文檔簡介
1、目的:
動態(tài)觀察微管親和調(diào)控蛋白激酶-1(Microtubuleaffinity-regulating kinase,MARK1)在戊四氮(Pentylenetetrazole,PTZ)癲癇點(diǎn)燃大鼠模型中海馬的動態(tài)表達(dá),并結(jié)合苔蘚纖維出芽的變化,分析二者之間的聯(lián)系,探討MARK1在苔蘚纖維出芽中的作用,從而為癲癇的治療提供新思路。
方法:清潔級健康雄性成年SD大鼠90只,隨機(jī)將其分為生理鹽水對照組(30只)、戊四氮組
2、(60只)。兩組均予以腹腔注射的方法注射藥物,戊四氮組按30mg/kg每天注射PTZ,對照組予以等量的生理鹽水注射,每日一次。然后按照注射時間(第一次給藥后3天、1周、2周、4周、6周)將兩組各隨機(jī)分為5個亞組。每個亞組再分成兩個小組:一組用免疫組化法檢測各時間點(diǎn)大鼠海馬CA3區(qū)、CA1區(qū)、齒狀回、門回的MARK1表達(dá);另外一組予以Timm染色并進(jìn)行評分,檢測苔蘚纖維出芽情況。
結(jié)果:
1、動物模型
大鼠在
3、連續(xù)注射PTZ21-28天后被點(diǎn)燃,平均23.6±2.0天。模型點(diǎn)燃率95.8%,死亡率5%。達(dá)到點(diǎn)燃標(biāo)準(zhǔn)的大鼠可見自發(fā)發(fā)作,腦電圖可見癇性波。對照組未出現(xiàn)癇性發(fā)作,腦電圖也無癇性波。
2、苔蘚纖維出芽的動態(tài)變化
(1)戊四氮組:CA3區(qū)戊四氮組各時間點(diǎn)苔蘚纖維出芽評分從3天開始評分逐步增加,到2周時達(dá)高峰,并維持至第6周,與對照組相比其增加均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
(2)齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)各時間點(diǎn)
4、苔蘚纖維出芽評分與對照組比較均無顯著性差異。
(3)生理鹽水對照組CA3區(qū)和齒狀回顆粒細(xì)胞上區(qū)苔蘚纖維出芽評分各時間點(diǎn)之間無顯著差異。
3、MARK1的動態(tài)變化
(1)戊四氮組:與對照組比較,MARK1蛋白在海馬各區(qū)的表達(dá)3天組開始已有下降,并持續(xù)至第6周組。各區(qū)、各時間點(diǎn)MARK1表達(dá)與對照組兩兩比較:CA1區(qū)4周組、6周組下調(diào)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;CA3區(qū)1周組與對照組比較下調(diào)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0
5、.05),2、4、6周組與對照組比較下調(diào)有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);齒狀回與對照組比較3天組下調(diào)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),1、2、4、6周組下調(diào)有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);門區(qū)3天組、1周組、2周組、4周組、6周組與對照組比較下調(diào)有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
(2)對照組:海馬各區(qū)MARK1蛋白表達(dá)在各時間組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4、戊四氮組海馬CA3區(qū)苔蘚纖維出芽評分變化與MARK1蛋白表達(dá)
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