不同粘附劑、固定液及防冰晶法對冰凍切片質(zhì)量的影響.pdf

1、冰凍切片技術(shù)是一種常用的獸醫(yī)病理學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，主要用于獸醫(yī)臨床快速診斷、脂肪染色及組織內(nèi)抗原抗體反應(yīng)或酶的檢測。但獸醫(yī)臨床病理學(xué)診斷中，常常出現(xiàn)由于冰凍切片質(zhì)量不佳而判斷失誤的情況。本試驗(yàn)為提高冰凍切片質(zhì)量，以動物的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及肌肉等為試驗(yàn)材料，利用常規(guī)組織學(xué)和冰凍切片技術(shù)，進(jìn)行不同粘附劑、固定液及防冰晶法對冰凍切片質(zhì)量影響的研究。結(jié)果表明:
　　1、不同粘附劑對固定組織冰凍切片質(zhì)量的影響。經(jīng)蛋白甘油、多聚賴氨酸、

2、明膠硫酸鉻鉀三種粘附劑處理過的載玻片及從試劑公司購買的載玻片防脫片效果存在明顯差異。經(jīng)多聚賴氨酸處理過的載玻片的脫片率為0％，防脫片效果最佳，其次是明膠硫酸鉻鉀（脫片率為5％），而經(jīng)蛋白甘油處理過的載玻片和從試劑公司購買的載玻片脫片率達(dá)66％和92％，防脫片效果較差。
　　2、不同固定液對新鮮組織冰凍切片質(zhì)量的影響。六種固定液短時間固定對新鮮組織冰凍切片的制片效果及H.E染色效果的影響各不相同。其中乙醚酒精1∶1固定效果效果最好，

3、其次是AAF固定液、4％多聚甲醛，而95％乙醇、中性福爾馬林和AF固定液的效果差。
　　3、不同防冰晶法對新鮮組織冰凍切片質(zhì)量的影響。不同防冰晶法均有去冰晶作用，但消除程度存在差異，其中液氮直接冷法和異戊烷處理25 s的異戊烷-液氮法效果最好，而蔗糖梯度脫水法和異戊烷處理20 s、30 s的異戊烷-液氮法效果均差。
　　由此可知，制作一張高質(zhì)量的冰凍切片，應(yīng)采用以下方法:固定組織冰凍切片時，采用多聚賴氨酸處理過的載玻片;制作