Pin1基因敲減對SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞氧反常損傷與細(xì)胞遷移的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、分類號:號:R363R363學(xué)校代碼:學(xué)校代碼:1039210392學(xué)科專業(yè)代碼:學(xué)科專業(yè)代碼:100104100104學(xué)號:號:21401026052140102605碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文Pin1基因敲減對基因敲減對SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞氧反常損傷與細(xì)神經(jīng)細(xì)胞氧反常損傷與細(xì)胞遷移的影響胞遷移的影響EffectionsofPin1GeneKnockdownonSHSY5YNeuralCellsInjuryInducedbyOxygen

2、ParadoxitsCellMigration學(xué)位類型:型:醫(yī)學(xué)碩士醫(yī)學(xué)碩士所在學(xué)院:院:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院申請人姓名:申請人姓名:楊立楠楊立楠學(xué)科、專業(yè):學(xué)科、專業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)病理學(xué)與病理生理學(xué)導(dǎo)師:師:余涓余涓教授教授研究起止日期:研究起止日期:2015年9月至月至2017年3月答辯委員會主席:答辯委員會主席:周瑞祥周瑞祥教授教授答辯日期:期:2017年05月31日二○一七年一七年五月目錄英文縮略詞英文縮略詞.......

3、............................................................................................1中文摘要中文摘要.......................................................................................................3英文摘要英文摘要.......

4、................................................................................................6第一部分第一部分Pin1基因敲減對基因敲減對SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞氧反常損傷的影響神經(jīng)細(xì)胞氧反常損傷的影響引言.....................................................................

5、........................................10材料和方法材料和方法.................................................................................................141材料..................................................................

6、................................141.1實(shí)驗(yàn)細(xì)胞.......................................................................................141.2慢病毒表達(dá)系統(tǒng)...........................................................................141.3

7、主要試劑及試劑盒.......................................................................141.4實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備...............................................................................152方法..............................................

8、....................................................152.1SHSY5Y細(xì)胞培養(yǎng)......................................................................152.2細(xì)胞分組與模型制備...................................................................16

9、2.3慢病毒制備...................................................................................162.4慢病毒感染SHSY5Y細(xì)胞.........................................................182.5檢測慢病毒感染的效果.......................................

10、........................192.6倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)...................................................202.7Westernblot檢測Pin1、pBim、Bax蛋白表達(dá)水平................212.8MTT法檢測細(xì)胞存活率..........................................................

11、....232.9AOEB染色法檢測細(xì)胞凋亡.......................................................242.10細(xì)胞免疫熒光法檢測Pin1、Hsp60、pBim蛋白的表達(dá).......242.11JC1試劑盒檢測線粒體膜電位(ΔΨm).................................252.12數(shù)據(jù)分析.................................

12、....................................................25結(jié)果結(jié)果.............................................................................................................271光鏡觀察SHSY5Y神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài).................................

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